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蛋白质组学在结核病诊断中的研究进展述··.综邓垂文,李永哲拯坦筮堡坌抚皇蜂压垫生旦筮鲞筮‘泄窖Э蒲г罕本┬鸵窖г罕本┬鸵皆悍缡C庖呖疲本关键词:蛋白质组学;结核病;,诊断;结核分枝杆菌;质谱技术中图分类号:文献标识码:文章编号:·结核病琓是一类由结核分枝杆菌。畉引起的慢性传染性疾病,结核病合并人类免疫缺陷病毒感染及多重耐药结核菌株的出现加大了控制结核病的难度。人类基因组测序计划的完成以及蛋白质组学技术的日益成熟,使结核病诊断的研究重点从基因组学转向更能确切地反映机体即时状态,在疾病诊断方面有广泛研究和应用价值的蛋白质组学。本文就蛋白质组学在结核病诊断中的研究进展做一综述。鞍字首檠Ъ际基本概念年,澳大利亚学者蚖首先提出蛋白质组的概念。蛋白质组指由一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质,亦指细胞或组织或机体全部蛋白质的存在及其活动方式。蛋白质组学以蛋白质组为研究对象,分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,最终在整体水平上研究蛋白质的组成与调控的活动规律。主要技术蛋白质分离技术、基于质谱,牡白质组学鉴定技术、蛋白质组学定量技术和生物信息学是蛋白质组学研究的主要技术。常用的蛋白质分离技术有基于凝胶的二维凝胶电泳退蛴ü獠钜炷旱缬炯际瓺⋯,以及基于色谱的高效液相色谱投辔合嗌准际,蒥。质谱技术为蛋白质组学研究中的核心技术,其基本原理是带电粒子在磁场或电场中运动的轨迹和速度依粒子的质量与携带电荷之比屎杀的不同而变化,可以据此来判断粒子的质量和特性。根据蛋白质离子化方法的不同可以分为表面增强激光解析离子化飞行时间质谱甌.⒒·,狹。经过质谱技术初步检测可得蛋白质指纹谱,再利用肽质量指纹技术琍透种生物信息学平台,如,,虶等可最终确定样本中包含的蛋白质种类。D壳埃τ帽冉铣墒斓牡鞍字首檠Ф糠治霾呗灾饕有两种,一种是基于传统双向凝胶电泳及染色基础上的定量,代表技术为双向荧光差异凝胶电泳一涣硗庖种是基于质谱检测技术的定量,代表技术有细胞培养中稳定同位素标记氨基酸⑼凰乇昙堑那缀捅昵和同位素标记的相对和绝对定量技术。生物信息学是以分析各种数据的生物学意义为目的,运用数学与计算机手段收集、加工和分析生物信息的科学。蛋白质组研究中,它可以辅助我们预测蛋白质结构与功能,发现并确认蛋白质的相互作用和寻找编码该蛋白的基因。已建立的蛋白质相关数据库有:、数据库和蛋白质组分析数据库等”诮岷瞬≌锒现械难芯世界卫生组织年全球结核病流行病学报告显示,至年,每年新增结核病患者蚶劳万例,结核病的早期、特异性诊断是控制其死亡率的重要前提之一【。畉嘌墙岷瞬≌锒辖鸨曜迹亲钪盏玫浇峁需要周,对患者的早期诊疗是非常不利的。痰涂片镜检亦为诊断方法之一,但是其灵敏度仅为—%。血清学诊断易受交叉感染的影响,特异性不强。随着基因组学技术的发展,结核病诊断中开始出现畉锒希涮匾煨晕~ィ黄淞槊舳仍—%间波动¨.相关蛋白质组学研究的深入为寻找新的结核病诊断标志物和研发收稿日期:基金项目:国家自然科学基金资助项目;“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项“十一五”计划课题作者简介:李永哲。,/—。,、
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琒芯坎新型诊断试剂盒奠定了坚实的基础。特异性抗原的寻找目前结核病的血清学诊断多由结核分枝杆菌