文档介绍：中国农业科学院学位论文马立克氏病病毒感染鸡羽髓蛋白质组学研究指导教师:刘长军副研究员培养单位:哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院密级:论文编号:研究生:丛锋申请学位类别:农学硕士专业领域名称:预防兽医学研究方向:动物传染病及病原分子生物学月】
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敝‘\\‘\\.’僦影%让嬲幻声学纱硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表中国农业科学院/马立克氏病病毒感染鸡羽髓蛋白质组学研究动物传染病及其预防兽医学研究方向病原分子生物学培养单位芯克哈尔滨兽医研究所签名导师论文题目论文作者丛锋专业指导教师刘长军硕姓名职称单位赵启祖研究员中国兽医药品监察室博导团硕导团中国农业科学院哈尔副研究博导口滨兽医研究所人高玉龙员军事医学科学院军事硕导口涂长春兽医研究所扈荣良崔尚金答王晓钧辩王秀荣委会议记录厥王永强论文答辩时间地点月日上午诠跏抟窖芯克パ醣ǜ嫣评主席阚贝口●
//年‘月/伊本人声明所里交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
摘要马立克氏病病毒’琈治B砹⒖耸喜〔《狙G錶型’琈、血清疭火鸡疱疹病毒,鲅G逍停鯩投约τ兄虏⌒浴粲疱疹病毒科禽疱疹病毒停鹨约γ庖吖δ苷习⒍裥粤馨椭琢龊椭惺嗌窬低乘鹕宋L卣的马立克氏病’,羌Φ闹匾4静 B砹⒖耸喜⊥币彩鞘赘鐾ü呙进行控制的肿瘤性疾病,因此受到医学界、兽医学界、病毒学界的广泛关注。哂醒细竦南赴岷闲裕腥镜南赴辽儆种类型,即赴细胞、巨噬细胞及羽毛囊和肾的上皮细胞。但羽髓上皮细胞成游离的有囊膜的病毒粒子的部位。大量有囊膜的感染性病毒粒子伴随羽屑的脱落释放到环境中成为传染源。羽髓杂贛的复制、装配和的传播流行具有重要意义,因此感染鹚枳橹南喙匮芯恳殉晌狹难芯咳鹊阒弧5壳按死嘌芯看蠖啻覦或水平上进行个别基因或蛋白的检测。蛋白质组学技术可以大规模鉴定蛋白质,更真实地反映蛋白质的表达情况。本文建立了适宜羽髓组织蛋白样品的双向电泳方法,对感染慷炯羽髓进行蛋白质组学分析,并对感染不同毒力局昙τ鹚枳橹钜斓鞍字首檠Ы醒芯俊建立鸡羽髓蛋白双向电泳方法以τ鹦庾橹Q芯慷韵螅怨滔鄍荻冉禾踅械鹊缇劢刮5谝幌颍捎么怪笔烷基磺酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳为第二向进行双向电泳。对上样量、不同范围胶条、一向设置参数、凝胶染色方法等进行一系列优化。结果显示羽髓组织在上可以得到较好的分离效果,采用热考染染色效果较好。应用软件对凝胶图谱进行初步分析,可分辨的蛋白点约觯煌疚实钠ヅ渎蚀笥ァ1狙芯拷⒘耸室思τ鹚璧鞍椎双向电泳方法,分辨率及可重复性均较高。该方法的建立为羽髓组织蛋白质组学研究提供了可靠的技术基础。强毒力腥炯τ鹚璨钜斓鞍字首檠а芯针对痈腥镜椒⒉〉乃母鼋锥危盟虻缬炯际醵愿腥綧强毒株后、、和鹚枳橹鞍椎牟钜毂泶锴榭鼋蟹治觥=峁允驹贛感染后四个时期各有显著差异表达蛋白点分别为觥个、个和觯煌ü势准际跫ǔ值鞍字剩芰看相关蛋白、增殖和凋亡相关蛋白、细胞骨架蛋白、信号传导蛋白、转录相关蛋白、免疫相关蛋白和其他功能蛋白。鉴定的诸多种差异表达蛋白为进一步揭示羽髓中母粗啤⒒虻谋泶镆及宿主的应答等打下基础。强、弱毒株感染鸡羽髓差异蛋白质组学研究针对俊⑷醵局甑母腥究赡芤鹚拗飨赴诘鞍姿缴系谋泶锴榭霾煌2捎盟虻泳技术,将慷綠旰腿醵疽呙缰闏腥镜挠鹚璧鞍籽贩直鸾兴虻缬痉掷耄并分析在粗频乃母鼋锥危俊⑷醵局旮腥竞笠鹚拗鞯鞍撞钜毂泶锴榭觥=峁允靖腥后检测到鱿灾钜毂泶锏鞍椎悖渲邢喽杂谝呙缰闏腥咀椋珿旮腥竞笊系鞅达觯碌鞅泶个。感染后觳獾个显著差异表达蛋白点,相对于同时期疫苗株琈和,是ㄒ荒芄恍段
感染组,这些蛋白点在株感染时全部上调表达。感染后觳獾个显著差异表达蛋白点,其中相对于疫苗株感染,株感染后上调表达觯碌鞅泶个。利用质谱技术鉴定出龅鞍椎愦种蛋白质分别是:一樗嵬亚饷浮⒘姿岜且旃姑负图琢蛳佘樟姿峄福欢杂诮徊浇沂綧致病机制上的差异及与宿主相互作用关系上的差异等研究具有重要提示作用。本研究通过双向电泳和质谱相结合的技术对感染τ鹚璧鞍捉胁钜斓鞍字首檠а究,获得的结果为进一步揭示胨拗鞯南嗷プ饔霉叵怠⒏腥拘圆《玖W拥某墒旌椭虏』提供了研究方向和素材。关键词:马立克氏病病毒;羽髓;双向