文档介绍：大肠菌群的概念◆大肠菌群(coliformbacteria)系指一群在37℃能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。◆包括埃希氏菌属、枸橼酸杆菌属、肠杆菌属和克雷伯氏菌属测定意义◆大肠菌群作为粪便污染指示菌。即在食品中检出大肠菌群,不仅反映食品被粪便污染总的情况,一定程度上也反映了食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况,具有广泛的卫生学意义。◆凡是大肠菌群数超过规定限量的食品,即可确定其卫生学上是不合格的,该食品使用是不安全的。大肠菌群数量的表示方法--MPNMPN:MostProbableNumber(大肠菌群最可能数)◆是采用一定的方法,应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。◆三管系列:对样品进行连续10倍梯度系列稀释,选择3个连续的合适的稀释度,每个稀释度接种3管到乳糖胆盐发酵管内培养,从规定的反应呈阳性管数的出现率,查取大肠菌群最可能数(MPN)检索表,报告每100mL(g)检样大肠菌群的最近似数。大肠菌群MPN的检验方法--多管发酵法大肠菌群的检验程序稀释大肠菌群阴性革兰氏阳性伊红美蓝琼脂平板报告乳糖胆盐发酵管革兰氏阴性无芽孢检样产气乳糖发酵管不产气不产气大肠菌群阴性大肠菌群阳性报告报告报告大肠菌群阴性革兰氏染色产气过程◆检样稀释◆乳糖初发酵试验(假定试验)◆分离培养◆乳糖复发酵试验(证实试验)◆(25g)放于含有225mL无菌生理盐水的三角瓶内,经充分振摇作成1:10的均匀稀释液。固体检样用无菌均质器。以8000-10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液;:10稀释液1mL,注入含有9mL无菌生理盐水的试管内,振荡混匀,作1:100的稀释液;,按上述操作依次作10倍递增稀释液,每稀释一次换用1支1mL无菌吸管;,选3个稀释度,每稀释度接种3管。每100mL消毒乳中大肠菌群MPN不超过40个乳糖初发酵试验(假定试验)◆目的:检查样品中有无发酵乳糖产酸产气的细菌。◆将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内;◆乳糖:选择作用,大肠菌群能发酵乳糖产酸产气;◆胆盐:抑制其它杂菌,特别是革兰氏阳性菌;◆溴甲酚紫:pH指示剂,细菌产酸后,培养基即由原来的紫色变为黄色,溴甲酚紫还有抑制其他细菌如芽孢杆菌生长的作用。