文档介绍：实验三双向琼脂扩散试验一、实验目的掌握双向琼扩试验的原理和用途掌握双向琼扩试验操作方法观察抗原、抗体在琼脂板中形成的沉淀线一、原理沉淀反应:将可溶性抗原与相应抗体混合,在电解质存在条件下,经过一定时间,即可形成肉眼可见的白色沉淀物单向琼脂扩散试验:指可溶性抗原在相应抗体的琼脂介质中的扩散,可定性、定量抗原双向琼脂扩散试验,是将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板内的相邻小孔中。两者相互扩散,当扩散到他们的浓度比例合适的部位相遇时,就会形成抗原抗体复合物的沉淀二、实验材料传染性法氏囊琼扩抗原传染性法氏囊琼扩阳性血清1%琼脂玻片、打孔器、加样器、tip头等三、步骤称取1g琼脂粉,加至100ml8%高渗盐水中,配制1%琼脂凝胶;稍冷至55℃却后浇板(4ml/块),注意载玻片应放水平,琼脂勿倒出板外;待凝固后在琼脂上打梅花孔(孔径2mm,孔距3mm),孔内的琼脂如未吸出则用注射器针头挑出封底:将玻片于酒精灯上烘烤背面(温度不宜过高,以不烫手为宜),使琼脂与玻片紧贴;将抗体按二倍比稀释法稀释成1:2,1:4,1:8,1:16,1:32中间孔加抗原,周围孔加倍比稀释抗体,其中一个孔加滴入生理盐水作为对照(小心加样,不要溢出)置37℃湿盒24-48h结果观察:在抗原抗体比例合适处,出现白色沉淀,以出现明显的沉淀线的最高稀释度为该抗体的效价四、作业实验报告(画图并解释实验结果)琼扩试验应注意哪些事项?琼扩试验有何意义?