文档介绍:虫肽蛋白在南美白对虾饲料中的应用研究
摘要试验以虫肽蛋白粉代替鱼粉的比例为试验因子,采用单因素梯度法。替代比例分4个水平,即试验1组(36%鱼粉组)、试验2组(24%鱼粉+12%虫肽蛋白组)、试验3组(12%鱼粉+24%虫肽蛋白组)和试验4组(36%虫肽蛋白组),每组设3个重复,每个重复60尾虾。测定各组生产性能及其虫肽蛋白表观消化率和超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、酚氧化酶(PO)活力和杀菌活力等非特异性免疫指标。结果表明:各组间生产性能无显著差异(P>);而南美白对虾肌肉中ACP、LZM、SOD、PO活力和杀菌活力随着虫肽蛋白粉用量增加而显著增加(P<)。说明虫肽蛋白粉可以作为一种良好的对虾饲料中动物蛋白原料。
关键词虫肽蛋白粉;表观消化率;非特异性免疫指标;动物蛋白原料
昆虫是地球上种类最多、生物量最大的尚未充分利用的生物类群,其食物转换率高、繁殖速度快、分布广、资源量大、蛋白质含量高、含有特殊的生物活性物质(如免疫活性物质和几丁质)。如果能将昆虫蛋白资源实现产业化生产,并且通过在水产养殖中进行饲料昆虫及其产物的应用技术研究,确定不同水产动物最佳的应用模式,将对弥补水产饲料蛋白资源的不足,促进水产养殖业及饲料工业的可持续发展具有重要意义。
本研究旨在探讨虫肽蛋白在南美白对虾养殖中的应用效果,明确在饲料中使用虫肽蛋白粉(部分)代替鱼粉后对南美白对虾生长及其免疫功能的影响,以及南美白对虾对虫肽蛋白的表观消化率,以期为虫肽蛋白粉的大规模推广应用提供帮助。
1 材料和方法
材料
虫肽蛋白粉由广州某生物蛋白股份有限公司提供。
试验所需要的南美白对虾取自番禺某养殖场,试验虾运回研究所暂养1周后挑选体质健壮、外观无明显症状、规格整齐的个体用于试验。试验虾的平均体长为(±) cm,平均体重为(±) g。
试验地点和试验条件
试验在中国水产科学研究院珠江水产研究所(广州)内进行。 m× m× m的小网箱中进行, m。网箱置于室外的水泥池中,网箱四周固定于池壁上。
试验用水为经过沙滤的天然池塘水。由于南美白对虾为海水品种,试验过程中在水池中添加了适量的海水晶,绝对盐度保持在1~2。~ ℃,绝大多数时间在25 ℃左右。整个试验过程连续充气, mg/l左右, mg/l左右。
试验方法
试验以虫肽蛋白粉代替鱼粉的比例为试验因子,采用单因素梯度法。代替比例分为4个水平,分别为试验1组(36%鱼粉组)、试验2组(24%鱼粉+12%虫肽蛋白组)、试验3组(12%鱼粉+24%虫肽蛋白组)和试验4组(36%虫肽蛋白组)。每组设3个重复,每个重复60尾虾。每种饲料随机投喂3个网箱。各组饲料配方及营养水平见表1。
日常管理
试验期间投饲率为其体重的4%~6%,具体根据虾的摄食情况,每天进行适当调整。每天分3次投喂,分别在8:00、12:00和16:00。每周换水、吸污一次,换水量为30%~40%。同时,在换水前取水样测量水的氨氮和亚硝酸盐,每天分两次记录水温、pH值和溶解氧(DO)。
亚硝酸盐的测定采用N-(1-萘基)-乙二胺光度比色法;氨氮的测定采用萘氏试剂比色法(GB 7479—87);温度和溶解氧测定用雷磁JPB607型便携式溶解氧分析仪;pH值的测定用PHB-8型笔式pH计。
试验时间及测定指标
试验时间从2006年9月1日开始,10月27日结束,共56 d。试验结束时各组逐尾记数,计算成活率并称量全部试验虾体重。
消化率的测定
干物质和蛋白质的表观消化率
基础饲料(鱼粉40%、豆粕20%、虾壳粉14%,其它同表1)添加1%的Cr2O3作为消化率测定外源指示剂,配制饲料时先将原料粉碎至过40目,人工充分混匀,加少量水后再用搅拌机搅拌均匀, mm左右的颗粒,自然风干。
养殖试验结束后,挑选
健康的个体,放养在400 L左右的塑料桶中,每个桶放养对虾15尾,连续充气,每天投饵两次,使之饱食。为保证水质清新,每天用虹吸法排污并换水1/3~1/4。设计2个平行样。
每天8:00和16:00各投喂一次,每次投饵30 min后清除残饵及排泄物,每隔2 h用虹吸法收集一次粪便。挑选包膜完整的粪便进行收集,将收集好的粪便放在太阳底下晒干,然后放在恒温干燥箱中(80 ℃)烘干。
饲料和粪便中的蛋白质用凯氏定氮法测定[2]。Cr2O3用湿式灰化定量法测定,用硝酸在加热的条件下硝化样品,然后用高氯酸氧化Cr2O3,用721分光光度计在35