文档介绍：密级: 学校代码:10075
分类号:Q93 学号:20091069

理学硕士学位论文

空气中 3 种常见病原菌
快速定量检测方法研究

学位申请人: 王景
指导教师: 吕志堂教授
学位类别: 理学硕士
学科专业: 微生物学
授予单位: 河北大学
答辩日期: 二〇一二年六月
Classified Index: CODE: 10075
.: Q93 NO: 20091069

A Dissertation for the Degree of

Study on Fast and Quantitative
Detection Method of mon
Pathogenic Airborne Bacteria

Candidate: Wang Jing
Supervisor: Prof. Lu Zhitang
Specialty: Microbiology
Academic Degree Applied for: Master of Science
University: Hebei University
Date of Oral Examination: June, 2012
河北大学
学位论文独创性声明

本人郑重声明: 所呈交的学位论文,是本人在导师指导下进行的研究工作及取得
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所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确
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作者签名: 日期: 年月日

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本学位论文属于
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2、不保密□。
( 请在以上相应方格内打“√”)
摘  要 
摘要
微生物主要以气溶胶的形式存在于空气中,气溶胶颗粒较小,容易造成空气污染。
空气微生物不仅是室内空气的污染源,而且是影响室内工作人员健康的一个重要因素。
本论文通过免培养方法研究了实验室空气细菌的组成和多样性,在此基础上建立了大肠
杆菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼氏不动杆菌这三种空气常见病原微生物的快速定量检测方
法。
采用微孔滤膜法采集实验室空气环境中的微生物,根据滤膜孔径、采样时间等因素
设计空气样品采集方案,发现适宜的滤膜孔径为 2μm,采样时间和气流速度对微生
物的采集效率的影响不明显,但需根据气体流速选择适当的采样时间,以保证得到足够
数量用于 DNA 提取的微生物;通过掺菌法比较 3 种 DNA 提取试剂盒和 DNA 快速提取
液的提取效果,发现土壤基因组 DNA 快速提取试剂盒的提取效果较好,但对金黄色葡
萄球菌 DNA 提取效率较低,加入溶葡球菌酶和改进操作后可满足空气样品宏基因组
DNA 提取;采用 16S rDNA 克隆文库法分析了空气样品细菌的多样性组成:包括芽孢
杆菌属(Bacillus) (%)、葡萄球菌属(us) (%)、不动杆菌属(obacter)
(%)、副球菌属(us) (%)、肠杆菌属(Enterobacter) (%)、棒状杆菌属
(Corynebacterium) (%)、贪铜菌属(Cupriavidus) (%)、赛托氏菌属(Schlegelella)
(%)、鞘氨醇盒菌属(Sphingopyxis) (%)、黄单胞菌属(Xanthomonadaceae) (%)、
微枝形杆菌属(Microvirga) (%)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas) (%)、非培养的假
单胞菌目(uncultured Pseudomonadales) (%) 和非培养的红细菌目(uncultured
Rhodobacterales) (%)。根据多样性分析结果,选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼
氏不动杆菌为空气中待测病原菌,大量调取这三种菌的不同基因的序