文档介绍:实验四硅胶薄层层析
掌握薄层硬板的制备方法。
掌握薄层色谱的一般操作方法。
了解薄层色谱在中药分析中的应用。
目的
仪器与试剂
双槽层析缸
玻璃板10*20 cm(厚3mm)
研钵
电吹风
天平()
硅胶G(薄层层析用)
生药当归、丹参
层开剂:正已烷:乙酸乙酯(9:1)20ml
硅胶G薄层板的制备:
称取硅胶G %的羧甲基纤维素钠溶液30ml在研钵中向一方向研磨混匀,去除表面的气泡后,在玻璃板上平稳移动进行涂布铺好后于室温下,置水平台上晾干,在反射光和透射光下检视,表面应均匀,平整,无麻点,无气泡,无损坏及污染,于110℃烘30min,冷却后立即使用或置于干燥箱中备用。
注意:两人做三块薄层板!!
硅胶G薄层板的制备
(已完成)
样品的制备
当归、丹参各2g,分别加10ml乙醇,,取上清液.
点样
用毛细管吸取上述二种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上。
,点样基线距底边2cm
。
展开
点好样的薄层板放入展开缸的展开剂中,以正已烷:乙酸乙酯(9:1)20ml为展开剂,浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜,密封,待展开至6-8cm,取出薄层板,晾干,用电吹风热风吹薄层板,至有斑点出现
观察
记录
日光下
紫外分析仪
点样
层析
7cm
2cm
.
Rf值=
斑点到原点的距离
原点到溶剂前沿的距离
思考题
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