文档介绍：11 1

豆科基因组学与遗传学(网络版), 2011 年, 第 2 卷, 第 31-39 页
Douke Jiyinzuxue Yu Yichuanxue (online), 2011, , 31-39
.
研究论文
Research Article
百脉根乙醇脱氢酶基因 LjADH1 的克隆、表达及酶特性分析
曾拓 1,2,3 , 柳参奎 2 , 罗汝叶 1,3 , 巩鹏涛 2,3 , 赵德刚 1 , 方宣钧 1,2,3
1. 贵州大学生命科学院, 贵州省农业生物工程重点实验室, 贵阳, 550025
2. 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心, 哈尔滨, 150040
3. 海南省农作物分子育种重点实验室, 海南省热带农业资源开发利用研究所, 三亚, 572025
通讯作者: xuanjunfang@; 作者
豆科基因组学与遗传学, 2011 年, 第 2 卷, 第 5篇 DOI: /.
收稿日期:2011 年 04 月 28 日
接受日期:2011 年 06 月 09 日
发表日期:2011 年 06 月 28 日
本文首次以英文发表在 Legume Genomics and ics 上。现依据版权所有人授权的许可协议,采用 mons Attribution License 对其
进行授权,用中文再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用,版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。如果读者对中文含义理解有歧
义,请以英文原文为准。
建议的引用格式如下:
Zeng et al., 2011, Cloning and Expression of An Alcohol Dehydrogenase from Lotus japonicus and Characterization of LjADH1, Legume Genomics and
ics(online), -13 (DOI: .)
摘要乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase ADH)是一种广泛分布在生物体中的酶,通常以 NAD+和 NADP+为辅酶,乙醇脱
氢酶在植物的生长、发育和抗逆性中都发挥着重要的作用。本研究用原产于日本宫古岛的二倍体百脉根(Lotus japonicus)
MG20 为材料,借助 ADH 基因的保守性在百脉根 cDNA 中克隆同源基因,并对基因进行表达与酶特性分析。该基因全长为
1 143 bp,编码了 380 个氨基酸。同源比对结果表明,该序列编码蛋白的氨基酸序列和 ADH 类蛋白具有较高同源性,推测
属于锌结合乙醇脱氢酶家族蛋白,我们将其命名为 LjADH1。将该基因连结到原核表达载体 pQE30 和真核表达载体 pYES2,
构建成 pQE30-LjADH1 和 pYES2-LjADH1,并且分别转入大肠杆菌 M15 和酵母 INVScl 中。通过对诱导条件的优化,在大
肠杆菌中表达了具有乙醇脱氢酶活性的 His 融合重组蛋白,表达量为 mg/mL,酶活性 U/mg。通