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微流控芯片电泳电导检测分离分析尿蛋白.pdf

文档介绍

文档介绍:第 39 卷分析化学 FENXI HUAXUE 研究报告第 8 期
( )
2011 年 8 月 11 Chinese Journal of 1Analytical Chemistry 1123 1128
~
DOI:.


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췍췍췍췍췍췍췍췍
研究报告췍
췍췍
微流控芯片电泳电导检测分离分析尿蛋白
1, 2, 3 1, 2, 3 1 2, 3 1
马亮波徐溢* 梁静刘海涛甘俊

李栋顺 1, 2 彭金兰 1, 2 吴珊 1
重庆大学化学化工学院 1 , 新型微纳器件与系统技术国防重点学科实验室 2 ,
(
微纳系统及新材料技术国际研发中心 3 , 重庆大学, 重庆 400030
)
摘要基于自行构建的微流控芯片电泳集成非接触式电导检测分析系统, 建立了一种集进样分离与检测

为一体的微流控芯片电泳电导检测蛋白质的方法, 并用于人白蛋白 HSA 和人转铁蛋白 TRF 两种尿蛋白的
( ) ( )
分离分析以及肾病综合症病人尿液中白蛋白的定量检测考察并优化了缓冲液分离电压进样方式进样时
。、、、
间等电泳分离的影响因素, 在缓冲液为 pH 10 的 10 mmol/L 硼砂溶液, 电进样场强为 300 V/cm, 进样时间 10 s,
=
分离电压为 600 V 的实验条件下, 10 min 内完成了 HSA 和 TRF 的分离检测, 分离度为 检出限分别为 和
;
g/L S N 3 , 在 1 5 g/L 线性范围内相关系数分别为 和 实验中肾病综合症病人尿样中
(/ = ) ~ 。
HSA 的加标回收率为 % %
~ 。
关键词微流控芯片集成电导检测尿蛋白电泳分离
; ; ;
1 引言

尿蛋白是肾脏疾病及糖尿病诊断的重要指标之一, 而尿中蛋白的检测也是尿液化学成分分析最重
要的项目之一目前, 临床尿蛋白的检测方法主要有免疫法, 凝胶电泳法试纸法和磺柳酸法免疫法
。、。
由于大多采用荧光或发光方法检测, 需对样品进行衍生化处理, 诊断试剂盒昂贵而临床常用的凝胶电
;
泳法需要对样本进行染色等, 其检测过程复杂, 试剂要求较高, 耗时长试纸法和磺柳酸法都是根据浊度
;
反应判断蛋白质为阴性或阳性的, 操作简便, 但是只能作为定性或半定量的依据, 并不能对尿液中的蛋
白质进行定量研究毛细管电泳技术相对于其它常规凝胶电泳技术, 具有自动化程度高, 试样用量少的

优点, 在蛋白质分析方面得到了广泛应用[1, 2] 而近年来以毛细管电泳技术为基础, 依托于微电子机械

系统 Microelectromechanical systems , MEMS 的微流控芯片电泳技术由于具有微型化快速高效高通
( ) 、、、
量样品用量少和易于集成化等特点, 在蛋白质的分离分析中得以广泛应用微流控芯片上蛋白质的检
、。
测方法主要有光学检测法和电化学检测法 Mazurzy 等[3] 利用离子