文档介绍：课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:__________________同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填)四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填)六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析(必填)八、讨论、心得酶的基本性质实验A、底物专一性实验目的和要求:;;,设计酶学实验。实验内容和原理:酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。↗相对专一性酶的专一性→绝对专一性↘立体异构专一性本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。Na2CO3+2H2O→2NaOH+H2CO3CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4还原糖(—CHOor—C=O)+2Cu(OH)2→Cu2O↓+2H2O+糖的氧化产物↓↓↓醛基***基砖红色或红色在分子结构上,淀粉几乎没有,而蔗糖全无半缩醛基,它们均无还原性,因此它们与Benedict试剂无呈色反应。淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。实验材料与试剂:1、实验材料⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1:10稀释);⑵新鲜唾液(含唾液淀粉酶)。2、实验试剂⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1:10稀释);⑵唾液淀粉酶液(唾液1:200稀释)⑶5%蔗糖(.)溶液;⑷%淀粉溶液(%NaCl);⑸Benedict试剂。实验器材与仪器:;;(37℃,100℃);;;;。操作方法和实验步骤:往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl)溶液3ml㈠检查试剂往三支试管中各加入Benedict试剂2ml取三支试管,编号1,2,3将三支试管摇匀,置于沸水浴中煮沸2~3min记录观察结果淀粉专一性往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl)溶液3ml往1,2,3试管中各加入唾液淀粉酶液1ml取三支试管,编号1,2,3将三支试管摇匀,置于沸水浴中煮沸2~3min往三支试管中各加入Benedict试剂2ml摇匀,置于37℃水浴中保温10min记录观察结果往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl)溶液3ml蔗糖酶的专一性往1,2,3试管中各加入蔗糖酶液1ml取三支试管,编号1,2,3将三支试管摇匀,置于沸水浴中煮沸2~3min往三支试管中各加入Benedict试剂2ml摇匀,置于37℃水浴中保温10min记录观察结果实验结果与分析:检查试剂:%淀粉(%NaCl)溶液(ml)35%蔗糖溶液(ml)3蒸馏水(ml)3Benedict试剂(ml)222摇匀,沸水浴2~3分钟记录观察结果淀粉酶专一性:%淀粉溶液(ml)35%蔗糖溶液(ml)3蒸馏水(ml)3唾液淀粉酶溶液(ml)111摇匀,37℃水浴10分钟Benedict试剂(ml)222摇匀,沸水浴2~3分钟记录观察结果(三)蔗糖酶专一性:%淀粉(%NaCl)溶液(ml)35%蔗糖溶液(ml)3蒸馏水(ml)3蔗糖酶溶液(ml)111摇匀,37℃水浴10分钟Benedict试剂(ml)222摇匀,沸水浴2~3分钟记录观察结果七、讨论、心得:设计第一组实验的目的是为了检测是否存在干扰因素;第二组实验是为了验证淀粉酶的底物专一性;第三组实验是为了验证蔗糖酶的底物专一性。三组实验中的蒸馏水都是作为对照用的。%NaCl的作用是为了保证淀粉酶的活性,同时***离子作为激活剂,可以增加酶的活性,使反应现象更加明显。试管要洁净,所有试剂加量要准确,加好试剂后要摇匀。使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。以免实验结果的错误。B、影响酶活性的因素——激活剂、抑制剂实验目的和要求:;。实验内容和原理:激活剂:能使酶的活性增加的物质。抑制剂:不引起酶蛋白变性,但能使酶分子上的某些必需