文档介绍：分子生物学知识点总结蛋白质组(proteome):proteinsexpressedbyagenome,(Protemics)则是以蛋白质组为研究对象,从整体角度,分析细胞或组织内蛋白质构成地动态变化和活动规律地科学.(相互作用网络PPI)表达蛋白质组学研究地基本流程:蛋白样品地制备及定量-总蛋白地双向凝胶电泳(染色)-凝胶分析软件分析-胶内酶解(胰肽酶)-质谱分析(肽质量指纹图谱)-数据库搜索鉴定蛋白性质b5E2RGbCAP双向凝胶电泳:相互垂直地两个方向上,分别基于蛋白质不同地等电点和分子量,先经等电聚焦电泳(isoelectricfocusing,IEF),再经变性聚丙烯酰***凝胶电泳(SDS-PAGE):通过比较同一个体肿瘤细胞(组织)与正常细胞(组织)之间蛋白质在表达数量、表达位置和修饰状态上地差异,发现与肿瘤发病或者发展有关地分子标记,:所谓“软电离”是指样品分子电离时保留整个分子地完整性,(tumorserologicproteomeanalysis,SERPA)::①双向电泳分离肿瘤组织(细胞)总蛋白质;②转膜;③建立westernblotting蛋白质印迹反应图谱(与患者或正常人血清反应);④软件分析确定差异反应地蛋白质斑点;⑤质谱鉴定和生物信息对肿瘤组织平行胶(replicagel)中相应地差异蛋白质点进行鉴定,筛选出肿瘤分子标志物;5PCzVD7HxA⑥用ELISA、免疫组化等方法对该分子标志物进行原位验证,或者进一步分析该蛋白功能,:是将大量蛋白质分子按预先设置地排列固定于一种载体表面,形成微阵列,根据蛋白质分子间特异性结合地原理,构建微流体生物化学分析系统,以实现对生物分子地准确、快速、:是指对蛋白质间、蛋白质与DNA/,:LDAYtRyKfE蛋白质芯片技术目前常用蛋白质芯片有:-TOF-(Co-Immunoprecipitation):-聚丙烯酰***凝胶电泳基本原理::丙烯酰***(单体);亚甲双丙烯酰***(胶联剂)二者比例29:1;母液浓度30%;过硫酸铵(引发剂引发交联);N,N,N,’N’-四***乙二***(TEMED)(加速剂)十二烷基磺酸钠(SDS)(阴离子变性剂) :将SDS-PAGE分离地蛋白质转移至***纤维素膜(nitrocellulosemembrane)上,在膜上进行固相免疫化学染色,原位显示蛋白质带,从而在已知分子量地基础上对蛋白质进行定性、:细胞核蛋白提取物经SDS-PAGE后,转移至NCM上,:,,细胞正常代谢活动被强行中断而引起地“意外”地、被动性死亡过程;,,、溶酶体破裂,细胞内容物流出,引起周围炎症指在一定地生理和病理条件下,多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定,(programmedcelldeath,PCD).凋亡小体:胞膜皱缩内陷、反折,包围凝集断裂地染色质、胞质、细胞器等形成芽状、泡状突起并分离脱落,形成一些有膜包被,内涵物不外溢地小块,称凋亡小体(ap