不同参数滚压模式对兔BMSCs 向软骨细胞分化促进作用的研究.pdf

文档介绍：1
中国修复重建外科杂志2013年1月第27卷第1期·89·
不同参数滚压模式对兔 BMSCs 向软骨细胞分化
促进作用的研究
孙明林 1 朱雷 1 吕丹 1 张春秋 2
【摘 要】  目的 观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对 BMSCs- 琼脂糖复合体中兔 BMSCs 向软骨细
胞诱导分化的作用。 方法 分离 月龄新西兰兔 BMSCs,培养至第 3 代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制
模具中形成直径 4 mm、高 4 mm 的圆柱形 BMSCs- 琼脂糖复合体。将样本分别在 Hz、3 h/d 基本参数下比较压缩量
10%、20%、30%(分别为 A1、A2、A3 组),以及 Hz、20% 压缩量基本参数下比较 20 min、3 h、12 h 滚压时间(分别为
B1、B2、B3 组)对 BMSCs 向软骨细胞分化的作用,以静态培养作为对照组。在培养 24 h 及 7、14、21 d 时取各组标本进
行死活细胞检测、实时定量 PCR 检测、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测及组织学染色观察。 结果 死活
细胞检测:14、21 d 时,A1、A2 组活细胞比率均显著高于 A3 组,B1、B2 组活细胞比率均显著高于 B3 组,差异均有统计学
意义( P < )。实时定量 PCR 检测:各实验组 7、14、21 d Ⅱ型胶原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA 表达均高于对照组,
差异有统计学意义(P < ); 14、 21 d时,A1、A2组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达均高于A3组,B1、B2组均高于B3组,
差异有统计学意义(P < )。以上指标 A1、A2 组间及 B1、B2 组间比较,差异均无统计学意义(P > )。 GAG 含量检测:
14、21 d 时,A1、A2 组 GAG 含量均显著高于对照组和 A3 组,B1、B2 组 GAG 含量也显著高于对照组和 B3 组,差异均有
统计学意义(P < ); 21 d 时 A1、A2 组间差异均有统计学意义(t=,P=)。组织学观察:21 d 时,A2 组和 B2
组出现明显蓝染,可见软骨陷窝样结构;而 A1、A3 组和 B1、B3 组蓝染效果较差,分布稀少。 结论 滚压载荷生物反应
器在 Hz、20% 压缩量、3 h 滚压时间参数下,能更有效地促进 BMSCs- 琼脂糖复合体中兔 BMSCs 向软骨细胞诱导分化。
【关键词】  BMSCs  软骨细胞  生物反应器  滚压载荷  兔
EFFECT OF PRESSION LOADING BIOREACTOR ON CHONDROGENESIS OF RABBIT BONE
1 1
MARROW MESENCHYMAL STEM CELLS WITH DIFFERENT LOADING PARAMETERS/SUN Minglin , ZHU Lei ,
LÜ Dan1, ZHANG Chunqiu2. 1Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of Chine