文档介绍：描述:葡萄糖为组织细胞提供能量。生理性饥饿、剧烈运动、营养不良状态血糖降低,肥胖、糖尿病等疾病血糖升高。试剂盒采用葡萄糖氧化酶法,是世界卫生组织和中国《全国临床检验操作规程》推荐的临床血糖检测方法。经过改良使灵敏度比普通方法提高约10倍至5~10µmol/L,线性范围10~20000µmol/L。可检测血液、食品饮料,以及组织细胞内低浓度葡萄糖含量,胜任各种临床和基础实验测量。原理:根据Trinder反应原理1,2,葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2);然后用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢,使色原物质(4-氨基安替比林)生成醌亚***,颜色的深浅与葡萄糖浓度成正比。用途:测定人及动物血清、血浆、脑脊液、组织细胞孵育液及其裂解液等样品中的葡萄糖含量。尿液葡萄糖测定推荐使用“邻甲苯***(o-Toluidine)法试剂盒#E1011”。组成(205次微量检测,50次1ml检测):(1)(等于180mg/100ml);(2)32ml试剂R1;(3)8ml试剂R2。常温运输。到达后避光4ºC保存3月。所需设备:721、722型可见光分光光度计、酶标仪、生化分析仪。最佳工作波长550-555nm,如仪器无此波长建议优先选用570、530、490nm。比色杯光径1cm。配制工作溶液:按4:1比例,取8ml试剂R1,与2ml试剂R2混合得到10ml工作溶液。当天使用或4ºC保存1周。标准品稀释:10mM葡萄糖标准品用蒸馏水或与样本缓冲液一致的液体稀释为2000、1000、500、250、125、、、µM。注意设置0浓度对照反应管。由于葡萄糖测定反应的线性关系甚好且范围很宽,通常设置黑体标记的4管即可,不需要设置>2~10mM的标准管,以此得到的标准曲线用来>2mM葡萄糖浓度通常不会失真。世界卫生组织(WHO)推荐也可仅设置单一浓度的标准管。不能使用用户自己简单配制的葡萄糖标准溶液。三、测定操作:参见下表加样。先加标准品或待测样品,后加工作溶液。可依据葡萄糖浓度高低微量调整样品与工作液体积比例。超出线性范围可适当稀释。37ºC20min(15~30min)。或25ºC室温反应30min但灵敏度略降。反应平衡后颜色在60min内稳定。先用蒸馏水空白管调零,然后测定各管OD550或570nm值。绘制标准曲线并计算葡萄糖浓度。Excel作图步骤:各标准管OD值为y轴,浓度为x轴。(1)鼠标左键圈住数据,点击做图向导,选择-散点图-,点击-完成-。(2)鼠标右键点图上的某一点,点击-添加趋势线-,点击-选项-,点击-显示公式-和-R2值-。如果仅用单一标准管:葡萄糖浓度(mmol/L)=标准品浓度×(样品OD-空白OD)/(标准管OD-空白管OD)。加样与测定表(可微量调整样品与工作液体积比例)微板测试,反应体积200μl比色杯测试,反应体积800μl空白管标准管测定管空白管标准管测定管蒸馏水μl5蒸馏水μl20标准品μl5标准品μl20标品μl5标品μl20工作溶液μl195195195工作溶液μl780780780说明:-(70-110mg/dl),-,-