文档介绍：脑脊液病原菌16S rRNA微型寡核苷酸芯片检测方法的初步研究
作者:毕春霞,武静,张德坤,苏维奇,刘成玉,闫志勇
【关键词】脑脊髓液;细菌;寡核苷酸芯片;寡核苷酸序列分析
[摘要]目的初步建立一种脑脊液标本中常见病原菌的快速检测方法。方法根据脑脊液标本中常见病原菌16SrRNA基因保守区的序列设计用于基因扩增的通用引物,制备细菌的通用探针、革兰阳性和阴性菌通用探针,以及肠杆菌科属、嗜血杆菌属和脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌的属或种特异性探针,将探针加尾后固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片。提取标本中病原菌DNA后用通用引物行PCR扩增,扩增过程中用生物素标记;将产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,检测脑脊液中细菌的感染情况。结果所有探针均只与其相应的细菌DNA扩增产物反应产生杂交信号。结论建立的脑脊夜病原菌寡核苷酸芯片能够准确、敏感、快速、高效地检测脑脊液标本中病原菌的感染情况。
[关键词]脑脊髓液;细菌;寡核苷酸芯片;寡核苷酸序列分析
[ABSTRACT]ObjectiveTodeveloparapiddetectionmethod
monpathogensincerebrospinalfluid(CSF).Me-ordingtotheconservativeandvariableregionsinbacterial16SrRNAgenes,,andsubjectedtoUP-PCRtoamplifytar-getfragments,whichwerelabeledwithbio-16-,-chipcanspecificallyscreenoutthepathogensinCSF.
[KEYWORDS]cerebrospinalfluid;bacteria;macroarraying;oligonucleotidearraysequenceanalysis
细菌性脑脊髓膜炎是一种发病急、病死率高的常见的中枢神经系统疾病,需要及时有效的Medicine治疗,而其有效治疗主要取决于对脑脊液中感染的病原菌进行快速而准确的检测和鉴定。目前临床