文档介绍：蕿***【实验题目】蚂动物细胞融合袁【实验目地】【实验材料与用品】蝿1、材料蚅鸡血红细胞螂2、试剂 蚃50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、%***化钠溶液. 膆3、 器材 螈倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、【实验原理】蝿细胞融合是指在自发或者诱导条件下,,包括:病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合. b5E2RGbCAP袈 1、病毒诱导融合 蒆仙台病毒、牛痘病毒、,这些病毒即可诱导细胞发生融合. p1EanqFDPw羂 2、化学诱导融合  膀很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚乙二醇(PEG)、二***亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、,在去除这些物质之后,,细胞膜融合,胞质流通,,操作方便,诱导融合地概率比较高,效果稳定,适用于动、植物细胞,.  DXDiTa9E3d薀3、电激诱导融合  芅包括电诱导、,电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子,沿电力线排布成串,再利用高强度、短时程地电脉冲击破细胞膜,细胞膜地脂质分子发生重排,由于表面张力地作用,、融合概率高、无毒性、作用机制明确、【实验步骤】肈在本次实验中采用地是化学诱导融合地方法,:肄取鸡血2ml+2mlAlsever液,再加入6mlAlsever液,混匀后制悬液(4℃保存)【老师已做好,可直接使用】 5PCzVD7HxA膁取(1)中悬液1ml+%地NaCl溶液,进行以下三次离心处理:肂在1200r/min下离心5min,去掉上清液,%地NaCl溶液至5ml;螀1000-1200r/min下离心5min,去掉上清液,%地NaCl溶液至5ml;肇1000-1200r/min下离心7min【因时间关系此次实验只离心一次】 芁3、 将离心后地沉降血球(-)加入GKN至1-2ml,使之成为10%地细胞悬液;jLBHrnAILg腿4、 取上述10%地血球悬液1ml,加入3mlGKN液,使每毫升含血球15000000个; 芈5、分别取(4)1ml+%PEG,(4)+%PEG,(4)+%PEG,xHAQX74J0X袆混匀滴片,编号分别为-3min后,【实验结果】羀实验中可观察到两个和多个细胞发生质膜融合现象,可看到不同融合状态地细胞:薅两细胞地细胞膜相互接触、粘连;蚅接触部分地细胞膜崩解,两细胞地细胞质相同,形成一个细胞质地通道,