文档介绍：学案49 DNA重组技术的基本工具和基因工程的基本操作程序
考纲要求
Ⅰ
Ⅱ
复习要求
基础自查
基因工程是指,通过技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出。基因工程是在水平上进行设计和施工的,又叫做。
(限制酶)
(1)来源: 。
(2)功能:
。
(3)结果:产生的DNA片段末端通常有两种形式: 。
2. DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)比较:
①相同点: 。
②区别:
(2)与DNA聚合酶作用的异同:
(1)载体具备的条件:
(2)最常用的是其它载体:
第一步:
原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有
。
(1)原理:
(2)过程:: 。
第二步:
: 。
:
(1)启动子: 。
(2)终止子: 。
(3)标记基因的作用:
。
第三步:
:
a、将目的基因导入植物细胞方法: 。
b、将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是。此方法的受体细胞多是。
C、将目的基因导入微生物细胞:最常用的原核细胞是,其转化方法是:
。
第四步:
,方法是采用。
,方法是采用
。
,方法是,用。
。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
课堂深化探究
别名
基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结果
与杂交育种相比
与诱变育种相比
原理
(1)几种酶的比较
种类
项目
限制酶
DNA连接酶
DNA聚合酶
解旋酶
作用底物
作用部位
作用特点
作用结果
(2)限制酶与DNA连接酶的关系
(1)作用
(2)具备的条件
(3)种类
特别提醒①一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造。
②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因的检测。
基因工程技术生产凝乳酶的过程
(1)目的基因的获取途径
(2)基因表达载体的构建
特别提醒①插入的目的基因的表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入基因部位之前需有启动子,之后需有终止子。
②两次使用的限制酶为同一种酶,这样形成的黏性末端碱基之间互补,便于连接。
(3)将目的基因导入受体细胞(转化)
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
(4)目的基因的检测与鉴定
类型
检测内容
方法
结果显示
分子检测[来源:][来源:学科网]
导入检测
[来源:]
[来源:学科网ZXXK]
转录检测
翻译检测
个体水平检测
特别提醒:,只有第三步将目的基因导入受体细胞过程中不发生碱基互补配对,其他步骤均发生配对。
,以获得相同的黏性末端,利于基因表达载体的构建。
,其表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子,后须有终止子。
PCR技术
DNA复制
相
同
点
原理
DNA双链复制(碱基互补配对)
原料
四种游离的脱氧核苷酸
条件
模板、ATP、酶等
不
同
点
解旋
方式
DNA在高温下变性解旋
解旋酶催化
场所
体外复制
主要在细胞核内
酶
热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)
细胞内含有的DNA聚合酶
结果
在短时间内形成大量的DNA片段
形成整个DNA分子
对应训练
,错误的是( )
、植物或微生物
D