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纤维蛋白溶解系统检测.docx

上传人:小博士 2019/4/25 文件大小:58 KB

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纤维蛋白溶解系统检测.docx

文档介绍

文档介绍:纤维蛋白溶解系统检测高玉凤刘艳芝薄晶群(黑龙江省农垦总局牡丹江分局中心医院157000)【中图分类号1R446【文献标识码】A【文章编号11672-5085(2011)01-0191-03【摘要】纤维蛋白溶解系统(简称纤溶系统)一方面与血液凝固系统共同协调,使体内血凝块或血栓溶解,维持血循环的畅通;另一方面可使局部炎症灶得到清除,促进伤口愈合•使腺体、。【关键词】纤溶系统检测方法评价影响因素纤溶酶原测定纤溶酶原(plasminogen,PLG)测定有活性和定量测定,活性测定多采用发色底物法;定量测定可采用ELISA法或其他免疫学方法。此处介绍发色底物法原理。原理首先将链激酶(纤溶酶原激活剂)加入待检血浆,使纤溶酶原活化成纤溶酶。然后再加入显色底物。纤溶酶可以水解底物释放出显色剂PNA,PNA的量与血浆中纤溶酶原的量成正比。试剂与方法与上述发色底物法ATJII类似,此处不再做介绍,或可参照有关的操作说明书。血浆鱼精蛋白副凝固试验原理在凝血酶的作用下,纤维蛋白原释放出FPA、FPB后转变为纤维蛋白单体(FM),进一步牛成纤维蛋白。纤维蛋白在纤溶酶的作用下产生纤维蛋白降解产物(FDP),FM与FDP的碎片可形成可溶性复合物,鱼精蛋白可使该复合物中的FM游离,FM再自行聚合呈肉眼可见的纤维状、胶状或胶冻状,木试验阳性可反映FDP尤其是碎片X的存在。材料10g/L鱼精蛋白溶液(),分装后置・20°C冰箱保存。阳性对照血浆。37°C水浴箱,离心机,试管等。3标本要求109mmol/L枸椽酸钠9抗凝血浆。4操作⑴取经枸椽酸钠抗凝⑴9),置37°C水浴分钟。加10g/,置37°C15分钟,、立即观察结果。5•注意事项抽血不顺利、抗凝不均匀、导管内抽血、标本放入冰箱或标本反复冻溶、未能立即观察结果、贫血、抗凝剂不足等均会导致假阳性结果。⑵严格控制水浴箱的温度和放置吋间,不然会造成假阳性或假阴性,如水浴温度未达37°C,重新加热至37°C吋会造成假阴性。。阴性:血浆透明、清晰、无不溶解产物产生。弱阳性:细颗粒沉淀。阳性:粗颗粒沉淀。强阳性:纤维蛋白丝、纤维蛋白网或胶冻形成。纤维蛋白降解产物(FDP)测定FDP各个碎片仍具有与纤维蛋白原及纤维蛋白相同的抗原决定簇,故有相同的抗原性,一般以人纤维蛋白原免疫家兔制备抗血清,利用抗血清通过各种免疫学方法检测FDP水平,常用的有胶乳颗粒凝集试验、ELISA试验及其他免疫学方法,此处介绍胶乳凝集法。1•原理胶乳凝集法。血清纤维蛋白(原)降解产物(6brindegradationproducts,FDP)检测是向被检血浆中加入FDP抗体包被的胶乳颗粒悬液,当血清中FDP的浓度等于或超过5mg/L时,便与胶乳颗粒上的抗体结合,则胶乳颗粒发生凝集。根据被检血清的稀释度可计算出血清FDP的含量。、缓冲液、阳性对照、阴性对照、胶乳反应板。3操作取被检者静脉血,以1570g离心5分钟,分离血清。用微量加样器吸取20μl胶乳试剂,置于胶乳反应板的圆圈内,再加入20μl被检血清,用玻棒搅匀,轻轻摇动3~5分钟。在较强的光线下观察结果,出现明显均匀的凝集颗粒者为阳性(FDP含量&