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RNAlater.doc

上传人:雾里行舟 2019/5/12 文件大小:22 KB

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RNAlater.doc

文档介绍

文档介绍:RNAlater(以下内容源于Qiagen公司的产品说明书,仅供参考),无毒的组织保存试剂。它能迅速稳定组织,保护非冷冻细胞RNA于原位。获得组织块后,迅速浸泡在RNAlater中保存,而不会引起RNA的降解,这样可以不必马上处理样品或将样品冷冻在液氮之中以备以后处理。RNAlater应保存在室温下,保质期6个月。如放置在4℃条件下则会引起沉淀,此时需加热到37℃才可澄清。RNAlater可广泛应用于多种脊椎动物样品。包括脑、心、肾、脾、肝、睾丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺。RNAlater对大肠杆菌、果蝇、组织培养细胞、全血细胞和一些植物也有效。RNAlater能否与RNA提取试剂盒兼容?RNAlater可与大多数RNA提取方法相协调。特别是TRIReagent.,RNAwiz,TōTALLYRNA,RNAqueous,andPoly(A)Pure。,在浸入RNAlater之前不能冷冻组织。简单切碎组织样品,,然后将组织碎块放入到5倍体积的RNAlater中保存。动物组织RNAlater不会溶解或破坏组织样品的结构。如果需要的话,仍可将已经平衡在RNAlater溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到RNAlater中。小器官如鼠肝、肾和脾可以完整地保存在RNAlater中。植物组织许多植物组织可以简单浸泡在5倍体积的RNAlater中保存。具有自然屏障防止扩散的植物如蜡表皮的叶组织可能需要先破坏其屏障,以允许RNAlater进入组织。组织培养细胞沉淀细胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS悬浮细胞,然后加5~10倍体积的RNAlater保存。白细胞如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAlater中。不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNAlater中,因为它们蛋白含量过高,与RNAlater混合后易形成不溶的沉淀。细菌RNAlater是抑菌的,虽然细菌在RNAlater中不能生长,但细胞仍保持其完整性。大肠杆菌保存在RNAlater中4℃条件下1个月仍很完整,产生不降解的RNA。-80℃建议用于批量保存。将样品在4℃条件下孵育过夜,然后从RNAlater溶液中取出样品保存于-80℃。对于组织培养细胞,不必移去RNAlater,只需简单冻存整个溶液。实验证明,细胞在-80℃条件下冻存于RNAlater溶液中并未出现溶解。样品可随后在室温下解冻及再冻存,其RNA的质和量都不会受到影响。保存于-20℃建议用于批量保存。将样品在4℃条件下孵育过夜,然后转移到-20℃。样品在-20℃条件下不会冻结,但在存贮缓冲液中会有结晶形成,这并不影响随后的RNA提取。样品可随后在室温下解冻及再冻存,其RNA的质和量都不会受到影响。保存于4℃厂家认为,目前尚无证据证明样品存于4℃1个月内会出现RNA降解。如果没有冰箱:将样品放在尽可能冷的环境中。如果周围温度超过25℃,应尽可能使RNAlater中的样品冰浴数小时。,浸泡在RNA提取溶液中。一旦将组织放入RN