文档介绍：实验九人ABO血型鉴定一、目的要求1、学****鉴定血型的方法。2、观察红细胞凝集现象,掌握ABO血型鉴定的原理。二、基本原理血型是指血细胞膜上特异抗原的类型。在人ABO血型系统中,红细胞膜上有A、B两种凝集原,英血清中存在能与红细胞膜上的凝集原发生反应的两种凝集素(抗体),即抗B凝集素和抗A凝集素。根据红细胞膜上有无A、B凝集原而将人的血型分为A、B、0、AB四种基本类型:红细胞膜上只有A凝集原者为A型血,其血浆中有抗B凝集素;红细胞膜上只有B凝集原者为B型血,其血浆屮有抗A凝集素;红细胞膜上既没有A凝集原又没有B凝集原者为0型血,其血浆中有抗A和抗B两种凝集素;红细胞膜上既有A凝集原又有B凝集原者为AB型血,其血浆屮既没有抗A凝集素也没有抗B凝集素。若将含A凝集原的红细胞与含抗A凝集素的血浆(或血清)混合,就会出现红细胞聚集成簇,这种现象称为红细胞的凝集反应(实质是抗原■抗体反应)。血型鉴定的方法就是根据这一原理设计的,将受试者的血液(主要是红细胞)分别加入标准A型血清(含抗B凝集素)和标准B型血清(含A凝集素)中,观察有无红细胞凝集现象发生,从而判断受试者的血型。三、材料与器械显微镜、离心机、采血针、玻片、滴管、1ml吸管、小试管、试管架、牙签、标准A型和B型血清、生理盐水、75%酒精、棉球、消毒棉签。四、实验步骤1、玻片法75%酒精棉球消毒耳垂或指端,待酒精挥发干后,以刺血针刺破皮肤,滴1~2滴血于盛有lml生理盐水的小试管屮混匀,两端作好标记(A、B或抗A、制成红细胞悬液。取洁净玻片一块,用蜡笔在玻片背面左右抗B)。将标准的A型(抗B)和B型(抗A)血清分别滴在玻片左右两端。用滴管吸取红细胞悬液分别滴在玻片左右两端。用滴管吸取红细胞悬液分别滴1滴于玻片两端的血清上,再用两支牙签分别混匀。lOmin后肉眼观察有无凝集现象。如无凝集现象,等3Omin后再观察,并根据凝集情况对受试者的血型作出判断(图1-50)。2、试管法取小试管2只,分别标明A、B,再加入A型或B型标准血清与受度者红细胞悬液各1滴,混匀后立即离心(lOOOr/min)Imin,取出后用手指轻弹试管底,使沉淀物被弹起,在良好的光源下观察。若沉淀物成团漂起,表示发生凝集现象;若沉淀物边缘呈烟雾状逐渐上升,最后使试管内液恢复红细胞悬液状态,表示无凝集现象。五、注意事项1、试管法较玻片法结果准确。2、肉眼看不清凝集现象时,应在低倍显微镜下观察。3、红细胞悬液和血清应新鲜,因污染可产生假凝集现象。4、凝集反应的强度因受检者抗体效价而异。在肉眼看不到凝集现象是否发生时,应在显微镜下观察并加以核实、5、注意是否有溶血现象,切勿把溶血当作不凝集(此处溶血和凝集均提示配血不和)。6、判断红细胞凝集,要有足够的时间。如室温过低,可延长观察时间,或将载玻片保持载37°C培养箱中。7、注意区分红细胞的叠连和凝集现象。前者经滴加1〜2滴生理盐水并混匀后,现象消失,而后者则不消失。8、在操作中,应严格分离各种检测用品,注意吸取标准血清的滴管和搅拌用的竹签等用品绝对不能混用;用玻棒蘸血时,也都是只蘸一次,避免交叉污染。9、玻棒蘸血切勿过多或过少,以免影响判断结果。六、思考题1、己知某人为A型(或B型)血,在无标准血清的情况下,可否对其他人进行ABO血型鉴定?如何进行?答: