文档介绍：安多霖对高强电磁脉冲辐照大鼠DNA损伤的影响
张翠兰1 刘润东2 吕慧敏1 郝述霞1 王春燕1
随着工业和电子信息科学的发展,家用电器等的普及,普通居民接触电磁辐射的机会也越来越多。长期接触电磁辐射是否会影响健康,如何进行有效的防护以及减轻其生物学效应,是人们普遍关注的问题。因此,近年来大量研究工作表明:电磁辐射可对生物体造成不同伤害[1-5],但目前国内外还非常缺少治疗电磁辐射的药物或防护剂。笔者对已获得国家生产批号的中药安多霖胶囊进行了实验观察。
1 材料和方法
安多霖:福州天地高新技术研究开发部提供(批号041201)。给药剂量分别为3、6和12 g/kg体重,蒸馏水配制。
动物与分组:SD大鼠,购于北京大学医学部实验动物中心,合格证号:SCXK(京)2002—2002。雄性,8~9周龄,体重(190士10)g。观察2 d后随即分成空白对照组、模型对照组和安多霖低、中、高剂量组。
方法
(1)给药与照射:动物每天上午灌胃给予受试物( ml/100 g体重)。连续给药8 d,第8天经高强电磁脉冲发生器以6×104 V/m全身照射2 min,照射后继续给药2 d。于照后第14天处死大鼠,取左侧股骨用生理盐水5 ml冲出骨髓细胞,1000 r/min离心10 min,弃上清,用5 ml生理盐水悬浮再离心,弃上清。沉淀细胞调整为2×104个/ml备用。
(2)碱性单细胞凝胶电泳试验:采用本实验室己建立的单细胞凝胶电泳技术[6]。①正常熔点琼脂糖(1%)100μl均匀铺在磨砂载玻片上,吸取85μl含105个细胞的低熔点琼脂糖(1%)均匀铺在正常熔点琼脂层上,加盖玻片4℃ 5 min,待凝固后弃盖玻片,再铺一层低熔点琼脂糖凝胶;②将制好胶的玻片浸入新配置的碱性细胞裂解液(含1% DMSO,1%Triton X-100等)中,裂解4 h或过夜;③取出凝胶玻片,置于碱性电泳液中展开20 min后,在25 V、300 mA电泳条件下电泳20 min;④用Tris-HCL缓冲液(pH )中和3次后100μl吖啶橙(2μg/m1)染色10 min,蒸馏水漂洗,加盖玻片在荧光显微镜下观察。每份标本计数50个细胞,同时用目式测微尺测量彗星长度。
统计学处理:采用方差分析法。
2 结果
一般健康状况和体重的变化:实验开始后动物的精神状态良好,皮毛柔顺,饮食正常,实验后期模型组动物精神状态和毛质变差。实验期间每周称量1次体重,结果显示各组之间的体重无统计学意义。
骨髓细胞DNA损伤的检测结果:动物经高强电磁脉冲全身照射2 min,模型组动物骨髓细胞彗星长度明显高于空白对照组,3个给药组则明显低于模型对照组(P<),给药组与空白对照组之间的差异也具有统计学意义,见表1。
表1 大鼠骨髓细胞彗星实验(DNA损伤)结果
组别动物数(只) 观察细胞数(个) 彗星长度(μm)
阴性对照组 6 300 ±
模型对照组 6 300 ±*
3g/kg 6 300 ±* #
6g/kg 6 300 ±* #
12g/kg