文档介绍：一、HPLC与经典LC区别
第十八章高效液相色谱法
经典LC:仅做为一种分离手段
柱内径1~3cm,固定相粒径>100μm 且不均匀
:分离和分析
柱内径2~5mm,固定相粒径<10μm(球形,匀浆装柱)
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:分析时间大大缩短;
经典LC: 分析周期长
: 高压输送流动相
经典LC:常压输送流动相
:柱效高,分离效率高;
经典LC:柱效低,分离效率低;
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:可以在线检测:
经典LC:无法在线检测
三、HPLC与GC差别
HPLC:能制成溶液的样品,不受样品
途广泛,占有机物的80%
GC : 能气化、热稳定性好、且沸点
较低的样品,占有机物的20%
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HPLC:流动相为液体
GC:流动相为惰性气体
HPLC:室温;高压
GC:加温操作
四、HPLC的特点和应用
“三高”“一快”“一广”
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第一节高效液相色谱法的主要类型和原理
一、主要类型
分配色谱法(partition chromatography)
吸附色谱法(adsorption chromatography)
离子交换色谱法(IEC)
空间排阻色谱法(SEC)
化学键合相色谱法(BPC)
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一、液固吸附色谱(LSC)
(1)极性:硅胶
适用:分离极性化合物
(2)弱极性:高聚物
适用:分离弱性化合物
利用溶质分子占据固定相表面吸附活性中心能力的差异。
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:
烷烃(底剂)+ 有机极性调节剂
(硅胶柱)
与组分性质和流动相性质有关
组分极性↑,被吸附能力↑,k↑,tR↑
流动相系统极性↑,洗脱能力↑,k↓, tR↓
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弱极性组分先出柱,强极性组分后出柱
(硅胶柱)
二、液液分配色谱法(LLC)
:
利用组分在两相中溶解度的差异
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正相色谱法—固定液极性> 流动相极性
极性小的组分先出柱
反相色谱法—固定液极性<流动相极性
极性大的组分先出柱
固定液易被带走流失,分析重现性差已被化学键合相替代
、反相液-液色谱法
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RP
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二、化学键合相色谱法
以化学键合相为固定相的色谱法,简称键合相色谱法(bonded phase chromatography;BPC)
化学键合相:采用化学反应的方法将官能团键合在载体表面所形成的固定相.
化学键合相优点
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