文档介绍：名利场论文开题报告篇一:开题报告本科毕业论文(设计)开题报告姓名:学号:学院:专业:班级:指导教师: 外语学院英语开题日期:20XX年10月26日篇二:本科论文开题报告******大学 20XX级本科生毕业论文开题报告芪合酶基因在大肠杆菌中的克隆学院:生命学院专业:生物技术021班姓名:*** 学号:XX 指导老师:刘**高级实验师一、选题的目的和意义: 白藜芦醇对植物来说,它是一种重要的植保索,能增强植株抵抗病原体的能力,并具抗癌、抗心血管疾病、抗突变、抗菌、抗炎、抗氧化、诱导细胞凋亡及雌激素调节等多方面有益人类健康的生物药理活性;因此。对白藜芦醇的研究引起了生物医学界工作者的高度重视。从大量的研究结果表明,白藜芦醇具有如下几方面生理功能及健康促进功效: 1在防治心血管病方面的作用白藜芦醇通过与人体内雌性激素受体的结合调节血液中的胆固醇水平,减少人患心血管病的风险。白藜芦醇还具抗血小板凝集作用,对血小板相互之间发生聚集形成血块并黏附在血管壁上的现象有抑制作用,从而抑制和减轻了心血管病的发生和发展。此外,白藜芦醇能抑制铜介导的低密度脂蛋白的氧化,还能通过螯合作用和消除自由基来保护低密度脂蛋白的过氧化,从而达到预防动脉粥样硬化和冠心病的作用。 2防癌作用白藜芦醇通过抑制人体内环氧化酶及过氧化氢酶的功能,可以对抗最初的细胞和亚细胞损伤,抑制肿瘤的发生、发展,达到防治癌症的作用,是一种很有希望的天然化学防癌剂。3保肝、利肝作用实验表明,白藜芦醇及其甙可以抑制类脂过氧化物在肝脏的堆积,从而减轻肝损伤。另据报导,具有抗氧化性的白藜芦醇可以调整肝脏星形细胞和星状细胞的功能,由此具有抵御肝损伤的功能。除此之外,白藜芦醇还具有抗炎、抗过敏、调节血脂、抗病原微生物等多种有益于人体的生物学作用,故在人体保健上有极其重要的应用价值。随着对白藜芦醇研究的不断深入,白藜芦醇在食品工业中的应用也将越来越广,在日本已有将植物提取的白藜芦醇作为食品;在国内也有将含白藜芦醇的植物提取物制成具有降脂、美容和减肥、抗癌的胶囊;还可以将其添加到各种酒中,配制出对心血管疾病有良好预防作用的低醇、高白藜芦醇的新型保健佐餐酒。因此,大力开发富含白藜芦醇的各种天然保健食品,将具有良好的经济效益。天然生产白藜芦醇等芪氏化合物产率低,生产周期长,因此利用基因工程的方法建立工程菌,获得高产细胞株,通过发酵的方法生产芪类化合物,就可以解决上述问题。建立能够高效克隆芪合酶基因的工程菌株,筛选得到含有芪合酶基因的转化子,选择合适的内切酶及酶切条件,就可以为后续的芪合酶基因的真核表达奠定基础。二、选题的依据: 白藜芦醇是由芪合酶催化1分子香豆烯辅酶A和3分子丙二酸单酰形成的,在植物受真菌感染和环境压力时产生。目前至少已经在21个科、31个属的72种植物中发现了白藜芦醇,常见的有葡萄科的葡萄属,豆科的落花生属、决明属、槐属。白藜芦醇除了能提高植物抵抗病原体的能力外,还具有抗癌、抗心血管疾病、抗突变、抗菌、抗炎、抗氧化、诱导细胞凋亡及雌激素调节等多方面有益人类健康的生物药理活性,深受生物医学界研究的重视。将目的基因(氨基酸机遇、抗原基因、酶基因、泌乳基因等)克隆到特定的微生物的基因上,如大肠杆菌、酵母菌、芽胞杆菌等受体菌,构成基因工程菌,可以高效快速地克隆、表达目的基因,获得目的产物。三、国内外研究概况: 目前,芪合酶基因研究主要集中在植物方面。国内,1999年,谭琳等为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因的克隆、植物表到载体的构建即倒入受体细胞的研究。20XX年,马兵钢等研究利用基因工程技术构建了附加果实特异表达启动子的芪合酶基因植物表达载体,并通过农杆菌直接转化技术将其转入LBA4404和EHA105,并采用PCR及限制性内切酶切分析对所获得的农杆菌工程菌株进行鉴定。 1990年,BayerAG等为了研究外源防御基因在导入植物体时能否产生抗性,将来自花生的芪合酶基因转入烟草中。当用紫外光和诱导物诱导时,芪合酶基因得以迅速表达。而芪合酶的产物——白藜芦醇则通过HPLC和抗血清得以鉴定。1993年,BayerAG等为了研究芪合酶基因的工程病原抗性,从葡萄中分离了芪合酶基因,转入烟草,再生的烟草植株对灰霉病抗性增强。在转基因植株中,每克鲜叶片中检测到400μg的白藜芦醇。1997年,PStark-lorenzen等将于葡萄的芪合酶基因用PEG介导的直接转化法导入具有重要商业价值的水稻品种Nipponare的原生质中。当用水稻病菌接种后,芪合酶特异性RNA的瞬时形成表明。葡萄芪合酶启动子在单子叶植物中同样具有活性,前期实验结果表明转基因水稻对Pyriculariaoryzae抗性提高。20XX年,、