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小鹅瘟病毒VP3基因的克隆表达及抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的研制.pdf

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小鹅瘟病毒VP3基因的克隆表达及抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的研制.pdf

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文档介绍

文档介绍:小鹅瘟病毒虻目寺”泶锛翱剐《煳病毒单克隆抗体的研制研究生:鹿钟文导师:秦爱建教授摘要要侵害日龄以内雏鹅和雏番鸭,以渗出性肠炎、心、肝、肾等实质器官炎症为特征,鹅细小病毒感染,又称为小鹅瘟怯鹅细小病毒,引起的一种急性、高度接触性、败血性传染病。主致病性强,死亡率高,是目前危害养鹅业的主要疾病之一。本研究对呙缰闟和流行株的蚪辛丝寺〔庑蚣靶蛄斜冉戏治觯粤秸叩牟糠稚镅匦进行了比较研究,并应用杆状病毒表达系统对呙缰闟的蚪辛吮泶铮利用庖連痗小鼠,制备了昕笹的单克隆抗体,为募觳夂防治提供了优良的生物学材料。《煳敛《綱基因的克隆与表达本研究对呙缰闟和流行株的蚪锌寺〔庑蚣靶蛄斜冉戏治觯测序结果表明,两株不同局甑腣基因核苷酸序列长均为,编码霭基酸。序列对比结果显示,%,氨基酸同源性为。ァ%。虽然呙缰闟和流行株的蛲葱越细撸ù咏鞣治隼纯矗员硐殖鲆欢ǖ牡厍钜煨浴和的测定结果为株对鹅胚的半数致死量~.猿斓陌胧死量为。.籊甓远炫叩陌胧滤懒为。/,对雏鹅的半数致死量为。/。表明两株局甓玖Α⒅虏×γ挥忻飨差异。ü炫咧泻褪匝椴舛肆株不同昕寡G宓腜⑼üG褰徊姹;な匝槎粤街瓴煌珿株的抗原性进行鹿钟文:小鹅瘟病毒缘目寺”泶锛翱剐《煳敛《镜シ】固宓难兄
菌惺芴赴秆〕鲋刈榇┧笾柿—H維昆虫细胞,获得了笹单克隆抗体的制备与鉴定本研究利用、魑?乖庖連痗小鼠。免疫三次后取其脾细胞与胞上清的Ъ鄯直鹞::。琼脂扩散试验证明甑タ垢顾寄苡肱ㄋ的小鹅瘟抗原产生明显的沉淀线。并且均能与杆状病毒表达系统表达的关键词:鹅细小病毒;颍簧镅匦裕恢刈楦俗床《荆坏タ寺】固比较,经过计算后得出两者抗原性相关系数ィ砻髡饬街闓毒株之⒆訨存在血清交叉反应,且抗原性交叉较大,属于同一血清型。应用畉瓸系统对局闟蚪辛吮泶铩J紫壤肂和双酶切将蚱未觩甌重组载体中切下,连接至杆状病毒转移载体校竦弥刈樽R浦柿.⒆W懈俗床《敬┧笾柿5拇蟪Ω重组杆状病毒—8莞俗床《驹靥逍蛄校齈鉴定,证实基因片段经重组到杆状病毒基因组中;用抗嗫寡G褰屑浣用庖哂ü饧觳猓峁鱿至谅色荧光,证明蚧竦搅肆己帽泶铩细胞进行融合,通过间接免疫荧光检测杂交瘤细胞上清,筛选获得了昕笹的单克隆抗体,分别命名为,。亚类鉴定结果表明,甑タ咕狪亚类。タ垢顾拖赴锨宓腎效价分别为:单抗腹水和细鞍追应,产生特异性的亮绿色荧光。本研究所获得的两株单抗为小鹅瘟抗原诊断方法的建立奠定了基础。鹿钟文:小鹅瘟病毒缘目寺”泶锛翱剐《煳敛《镜タ寺】固宓难兄
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目录原创性申明与使用授权书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅵ符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅶ文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究一:小鹅瘟病毒虻目寺∮氡泶铩牧稀椒ā峁謠念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..研究二:抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的研制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.牧稀峁致邸参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.鹿钟文:小鹅瘟病毒缘目寺”泶锛翱剐《煳敛《镜タ寺】固宓难兄一
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计量单位:鹿钟文:小鹅瘟病毒缘目寺”泶锛翱剐《煳敛《镜タ寺】固宓难兄血清中和试验组织培养半数感染剂量琋,***乙二二***。一澹一***’猣‘扎倒占升微克毫升转/分微升小时摩尔/升分钟毫摩/升天微摩尔/升单位皮摩尔干道尔顿千克碱基对克千碱基对毫克%蟆一烈一了琋,琋—畉¨疞痩//疞
鹅细小病毒的研究进展文献综述≡第一株禽细小病毒⋯,小鹅瘟的发现被引以为我国兽医学界的巨大成就。年,朱徐为燕等初步确定该病毒粒子的直径为.。年,郑玉美等测定了病毒西、广东、安徽、四川、河北、内蒙古、辽宁等省、市、自治区都相继报道过此病的流行,并由试验得出结论:我国的小鹅瘟是由同一种病毒所引起的,与鸭瘟病毒、雏镜以及扫描电镜在观察各器官