医学研究杂志诚聘审稿专家启事.pdf

文档介绍：· 仑善·
讨论过检测培养基中蛋白的活性,对转染效率及蛋
白表达情况进行监控与校正,大大提高了检测方法的
基因呈现高度的遗传多态性,这种多态性
科学性和可靠性。
是个体和种族间存在药物代谢差异的遗传学基础,也
利用新建立的体外检测方法,我们发现相对于野
是产生药物不良反应的重要遗传学基础。由于只有肝
生型的体外代谢活性,各突变型的体外
脏组织内可表达为数众多的细胞色素代谢酶,因
代谢活性从高到低依次为、、,各型活性下降
此开展人类蛋白的分离纯化、及体外研究是
一幅度与经典的昆虫微粒体检测结果一致。添加
项困难的工作。目前国际上多采用大肠杆菌、酵母、
特异性的药物双氯芬酸、甲苯磺丁脲等,同
昆虫细胞及哺乳动物细胞作为表达宿主,在体外大量
样会获得与荧光素底物趋势一致的实验结果,同时添
表达和纯化人类的蛋白,并通过在体外添加
加典型抑制剂后各型的活性均显著下降实验结果
特异性底物或抑制剂以研究相关的酶学特性。据文献
显示,表明新建立的体外活性检测方法具
报道,昆虫细胞表达系统中外源蛋白表达量可以高达
有很高的科学性和可靠性。由于该方法操作简便,只
~/,且昆虫细胞的细胞内环境与哺乳动
需一次转染,添加底物药物或抑制剂后孵育特定时间
物细胞接近,因而受到了众多研究者的青睐,但该
便可方便的检测待测蛋白、底物药物或抑制
系统操作步骤复杂,实验周期长达~个月,需要购
剂的相关特性,非常适宜于新突变体、新临床药物或
买价格昂贵的仪器、试剂,限制了其使用范围。哺乳动
抑制剂的体外活性分析,从而为个体化医疗、新药开
物细胞表达系统操作简便,无需添加细胞色素还原酶、
发等方面提供了比较理想的分析平台。
细胞色素等辅酶因子,细胞内环境更接近于人体内
参考文献
真实情况,但其外源蛋白表达量较其他系统明显偏低,
, , , . 一
底物代谢活性偏低,且受转染效率影响明显’。
.,,:—
本研究采用实验室研究常用的一细胞非李智,王果,
洲绿猴肾上皮细胞作为外源蛋白的表达宿主,,:—
高检测灵敏度,参照文献使用特异性的.
.,,:—
荧光素底物—作为检测底物,检测其分解
, , ,.
产物的荧光信号和分泌型荧光素酶的内参荧光
, .,,:
信号的比值作为的体外酶学活性,各型别间—
活性的差异趋势与已有报道一致。与已往报道, .
不同,为了进一步提高研究结果的科学性和严谨性, —
.,,:—
本研究并未裂解转染后的