文档介绍：五味保肝丸定性定量实验研究
作者:张伟,张云丽,谢旭善,于爽,孙晶
【摘要】目的建立五味保肝丸定性定量质量标准。方法薄层色谱法定性鉴别五味子和丹参的存在, 高效液相色谱法确定降酶丸中五味子甲素含量。结果定性鉴别五味子和丹参, 方法简便,图谱清晰;高效液相色谱法测定含量,结果准确,阴性无干扰。结论该实验方法可作为降酶丸的定性定量质量标准指标。
【关键词】五味保肝丸;薄层色谱;高效液相色谱;五味子甲素
五味保肝丸由五味子、丹参等中药组成, 是我院传统中药自制制剂(鲁卫药制字Z02080175),具有敛阴、活血、降酶功效, 用于乙型肝炎、转氨酶升高等病症, 临床应用近30年,疗效确切。为控制该制剂质量, 除常规检测项目外,实验研究五味子、丹参两味药的薄层色谱法鉴别方法,以及该制剂主要药效成分五味子甲素含量范围,为该制剂质量控制指标提供定性定量实验依据。
1 主要仪器、试剂与药材
主要仪器
Agilent 1100型高效液相色谱仪(美(上海),KQ100型超声波清洗器(昆山)。
主要试剂
五味子甲素对照品(中国药品生物制品检定所),甲醇为色谱纯(美国),水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
主要药材
五味保肝丸由本院制剂室提供,其他实验用药材取自本院中药库,经鉴定五味子为木兰科植物五味子Schisandchinensis(Turcz.)Bail的干燥成熟果实,丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza 。阴性对照品实验时现制。
2 薄层色谱定性鉴别
五味子定性鉴别
取五味保肝丸2g,研碎,加氯仿30ml,超声提取30min,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液;另取缺五味子的处方比例量的其他药材细粉2g,按上述方法,制成五味子阴性对照液。再取五味子甲素对照品,加氯仿制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30℃~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干。置紫外灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,五味子阴性对照液无此斑点。
丹参定性鉴别
取五味保肝丸3g,研碎,加乙醚20ml,超声处理10min,过滤,滤液挥干,残渣加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液;另取缺丹参的处方比例量的其他药材细粉2g,按上述方法,制成丹参阴性对照液;再取丹参酮ⅡA对照品,,作为对照品溶液。吸取上述3种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-醋酸乙酯(19:1)为展开剂,展开、取出、晾干。日光下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,丹参阴性对照液无此斑点。
3 五味子甲素含量测定
色谱条件
色谱柱:Agilent ODS柱(×150mm,5μm)。柱温:30℃,流动相:甲醇-水(80:20),流速:,检测波长:250nm。理论板数按五味子甲素计应不低于3000,五味子甲素峰与相邻峰分离度符合要求。
对照品溶液制备