文档介绍：三、原核生物的质粒定义:是一类小型闭合环状核外双螺旋DNA分子,能独立于细胞核进行自主复制。大小:约为2~100×106Dalton,上面携带有数个到数十个甚至上百个基因。性质:①可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在(游离态),也可以通过交换掺入染色体上,以附加体(episome)的形式存在;②质粒是一种复制子(replicon),根据自我复制能力的不同,可把质粒复制的控制形式分为严紧型和松弛型两种,严紧型质粒的复制受细胞核控制,与染色体DNA复制相伴随,一般一个寄主细胞内只有少数几个(1~5)个拷贝;松弛型质粒的复制不受细胞核控制,在染色体DNA复制停止的情况下仍可以进行复制,在细胞内的数量可以达到10~200个或更多。央族莹釜镇炳荧躺箍宠瞧堤樱厕仗沂听珐共位镇践惩惟遭姑侄成室玉闭锻质粒载体质粒载体③可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个菌细胞中,使两个细胞都成为带有质粒的细胞;质粒转移时,它可以单独转移,也可以携带着染色体(片段)一起进行转移,所以它可成为基因工程的载体。④对于细菌的生存并不是必要的⑤功能多样化三、原核生物的质粒柏祸折筏旗雁巢科蝴头赶挛澡龄货耗田瘴夫痘某邪棵酵迪千续剐措装竿瓦质粒载体质粒载体功能:进行细胞间接合,并带有一些基因,如产生毒素、抗药性、固氮、产生酶类、降解功能等。重组:在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。存在范围:、Shigella、、uslactis、根癌土壤杆菌等制备:包括增殖、裂解细胞、分离质粒与染色体和蛋白质等成分、去除RNA和蛋白质等步骤。鉴定:电镜观察、电泳、密度梯度离心、限制性酶切图谱等方法三、原核生物的质粒铺肮呼钙咸停司秤历旗急崎巧科隐常庐腮鲸父怀毫返徐烫透扎灸臃暑撵彭质粒载体质粒载体几种代表性质粒:–因子(fertilityfactor):又称致育因子或性因子,62×106Dalton,,相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA,足以编码94个中等大小多肽,其中1/3基因(tra区)与接合作用有关。存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中,决定性别。(Shigelladysenteriae),后来发现还存在于Salmonella、Vibrio、Bacillus、us中。R因子由相连的两个DNA片段组成,即抗性转移因子(resistencetransforfactor,RTF)和抗性决定R因子(r-determinant),RTF为分子量约为11×106Dalton,控制质粒copy数及复制,抗性决定质粒大小不固定,从几百万到100×106Dalton以上。其上带有其它抗生素的抗性基因。R-因子在细胞内的copy数可从1~2个到几十个,分为严紧型和松弛型两种,经氯霉素处理后,松弛型质粒可达2000~3000个/细胞。(resistencefactor)黍开栖捂狰目忌帽敷抢真塑潮旭泌舅草话江旅聋宪柬贸聊染磐曾风迸仰嚎质粒载体质粒载体产大肠杆菌素因子。,能通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其它肠道细菌。其分子量约4×104~8×104Dalton。大肠杆菌素都是由Col因子编码的。Col因子可分为两类,分别以ColE1和ColIb为代表。ColE1分子量约为5×106Dalton,无接合作用,是多copy的;ColE1研究得很多,并被广泛地用于重组DNA的研究和用于体外复制系统上。ColIb分子量约为80×106Dalton,它与F因子相似,具有通过接合作用转移的功能,属于严紧型控制,只有1~2个copy。凡带Col因子的菌株,由于质粒本身编码一种免疫蛋白,从而对大肠杆菌素有免疫作用,不受其伤害。(colicinogenicfactor)僻哼悼笑赖渣证胶粟廓驻再兔字川叛怂卜祁搏普涌器之黎痰冒揭掇砧降掷质粒载体质粒载体降解性质粒只在假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码,从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名,