文档介绍：选手班级: 选手姓名: 选手学号: 标本号:
血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
竞赛时间:15分钟
一、说明
,完成时间15分钟。
,不得相互询问或讨论。
、操作结果评分和考核时间评分之和。
。
二、实验原理
葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸(D-葡萄糖酸δ内酯),并产生过氧化氢:
葡萄糖+2H2O+O2葡萄糖酸+2H2O2
在色原性氧受体(如联大茴香胺、4-氨基安替比林偶氮酚)的存在下,过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色原物质,生成有色化合物。其颜色深浅与血清葡萄糖含量成正比。
三、实验器材
721分光光度计、小号试管≤7支、试管架1个、手动可调式移液器5~50μl、1ml和10ml刻度吸管各两支、记号笔1支、水浴箱、擦镜纸,废物容器等。
四、实验试剂
葡萄糖标准液、生理盐水、、酶试剂、酚试剂等组成的试剂盒。
五、实验标本
新鲜血清。
六、操作步骤
取3支小试管,按表进行操作。先配制10ml酶酚混合试剂(试剂比例R1:R2=9:1)。
加入物(ml)
测定管
标准管
空白管
血清
葡萄糖标准应用液
生理盐水
酶酚混合试剂
混匀,置37℃水浴中,保温10min,分光光度计波长500nm,,以空白管调零,分别读取标准管和测定管的吸光度。
七、数据记录与计算
标准管吸光度
测定管吸光度
裁判签名确认
(写出计算公式及过程)
裁判签名确认
八、报告
(如:血清葡萄糖:△.△△ mmol/L)。
裁判签名确认
选手班级: 选手姓名: 选手学号: 标本号:
血糖测定(葡萄糖氧化酶法)评分标准
序号
项目
考核内容
分值
扣分标准
扣分
得分
1
准备工作
报告参赛项目及序号
5
漏缺一项
1
着白大衣、帽、口罩、手套并按要求佩戴参赛签
着装不整、漏缺某一项
1
仪表端庄、头发符合要求
仪容、着装不整
1
小号试管、试管架、移液器及配套吸头、记号笔1支
缺选及多选、台面凌乱
1
检查仪器、试剂、标本状态并摆在操作台合理位置
无检查
1
2
操作
①试管编号
②空白管加蒸馏水30µl
③标准管加葡萄糖标准液30 µl
④测定管加血清30µl
⑤各管分别加酶工作液3 ml
⑥各管置37℃水浴保温10分钟取出比色
12
试管无编号
1
空白管加蒸馏水
1
标准管加葡萄糖标准
1
测定管加血清30µl
1
各管分别加酶工作液
1
加液顺序错
1
加错液
1
加液量不准确
1
无混匀
1
混匀不规范
1
无水浴
1
水浴时间不准确
1
反应液无倒回原试管
2
3
用722分光光度计比色
①调波长(500nm)
②清洗比色杯,将各管溶液倒入比色杯,置比色槽中
③调“T 1