文档介绍：Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuseHPLC分析在中药分析中的应用摘要:HPLC是一种非常有效并普遍实用的中药分析方法,可用于高分子、极性、离子和热不稳定化合物的分离分析。在中药的定性、定量和杂质检测等方面都发挥了重要的作用,该文综述了高效液相色谱技术在中药材定性、定量分析中的应用。关键词:高效液相色谱法沙罗子金银花一、HPLC法测定金银花不同部位中木犀草素的含量金银花是我国传统中药,为忍冬科忍冬属植物忍冬(LonicerajaponicaThunb)的干燥花蕾或待初开的花。其味甘,性寒,具有清热解毒、疏散风热,疏利咽喉、消暑除烦的作用,可治疗暑热症、泻痢、流感、疮疖肿毒、急慢性扁桃体炎、牙周炎等病。金银花主要含有挥发油、有机酸类、黄***类、三萜皂苷类、环烯醚萜、苷类和其他无机元素等有效成分。其中,以木犀草素及木犀草苷为代表的黄***类化合物,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用而备受关注。本文主要介绍了木犀草素在金银花不同部位中的含量。 仪器和试剂美国Agilent1100型高效液相色谱仪,Agilent1100LC化学工作站;超声波提取机(上海思伯明仪器设备有限公司);电子分析天平(北京赛得利斯公司)。甲醇、乙***(色谱纯,天津四友);石油醚、冰醋酸(分析纯,天津富宇);浓磷酸(分析纯,洛阳昊华);水为二次蒸馏水;木犀草素对照品(上海晶纯实业有限公司);木犀草苷对照品为实验室自制,结构通过UV、IR、NMR等光谱学方法鉴定,纯度经HPLC峰面积归一化法测定大于99%,可做定量分析之用。,用甲醇定容至10mL的容量瓶中,。,备用。,用甲醇定容至10mL的容量瓶中,。,备用。(花、叶、茎的表皮、茎)的样品各5g,每个平行4份,置索氏提取器中,加入120mL的石油醚,浸泡12h,70℃水浴中提取至溶液显无色,挥发干石油醚,之后加入100mL甲醇,超声提取3次,过滤、浓缩提取液,定容至5mL的容量瓶中,即为测定木犀草素的供试品溶液。,备用。精密称取上述4个部位的样品,同样的制备方法,最后浓缩提取液,定容至10mL的容量瓶中,即为测定木犀草苷的供试品溶液。,备用。-C18柱(×150mm,5um);流动相为甲醇(φ=%)-磷酸溶液(φ=50%);;检测波长3500nm;柱温30℃。在此色谱条件下,木犀草素对照品和金银花4个部位的木犀草素供试品溶液分别进样,金银花、叶和茎的表皮中木犀草素都能达到基线分离,-.,按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标,木犀草素对照品的含量(X)为横坐标,绘制标准曲线,其回归方程为Y=-+,r=。~。,重复进样5次,每次1uL,%(n=5)。,分别在0,1,2,4,8,12,16,24h进样1uL,测定峰面积,%(n=8)。,,分别进样3uL,测定峰面积,%。,各平行4份,,分别进样,进行含量测定,%,%,%,%,%,%。(花、叶和茎的表皮)的木犀草素供试品溶液,,对3个部位中木犀草素含量进行测定,每次进样3uL,测得金银花3个部位中木犀草素的含量(见表1).茎中没有木犀草素。