文档介绍：怎样用好高效液相色谱
液相色谱仪的正确连接
以下示例解释了不匹配的接头导致多种色谱法问题的原因:
如果前端太长,套圈不能密封——因而会发生泄漏……
如果前端太短,套圈可以密封——但是将会导致无效空间和混合的发生……
液相色谱仪的正确连接
连接出现泄漏后将会引发以下问题:
系统压力损失
注射假象(鬼峰)
出现混合室(死体积)将会引发以下问题:
色谱峰加宽
分辨率减低
显著残留
裂峰
引发色谱法问题的原因很多时,接头不匹配或使用不当将可能导致液相色谱仪的所有主要问题发生!
液相色谱仪的正确连接
在具体应用中,仅仅选择合适的管道类型和正确的管道尺寸还远远不够,但是……
…如果管道切割不当, 那么结果可能仍不理想。
液相色谱仪的正确连接
正确的切割技术确实能影响色谱法的质量……
不正确切割正确切割
流动相过滤头产生的问题
故障特征
“鬼峰”(由已被污染的过滤头造成)
保留时间不断改变(由于过滤头堵塞或部分堵塞)
溶剂过滤头的清洗
(1:4,V/V)的硝酸溶液烧杯中超声清洗15分钟;
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(正相系统注意将过滤头烘干)
流动相及储液器
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溶剂的等级
HPLC级
优级纯
分析纯
溶剂等级
微量分析、梯度洗脱
(除纤维毛,未溶解的机械颗粒)
优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂
,且除去有紫外吸收的杂质
溶剂纯度的影响
溶剂中的杂质会导致出现“鬼峰”,特别是
梯度洗脱时
注意: 只能使用色谱级的溶剂!
不能使用旧的或未经过滤的缓冲溶液