文档介绍：,使产品检验有据可依。、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等,必须经灭菌后方能使用。注:本实验采用湿热灭菌法,吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度和压力灭菌,一般是121℃()下灭菌20min。:、亚硒酸盐胱氨酸培养基(无需灭菌)、HE培养基、三糖铁培养基等,并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。,称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中,然后放到36±1℃的恒温培养箱内进行前增菌4-6h;,用灭菌好的吸管吸取10ml前增菌液接种与100ml亚硒酸盐胱氨酸培养基中进行二次增菌,恒温培养箱36±1℃,培养18-24h;,以无菌操作,用直径3mm的接种环挑取一环,划线于表面无凝结水的BS和SS琼脂平板各一个,于36±1℃培养18-24h。观察各个平板上有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。如无典型或可疑菌落,应再继续培养24±2h。然后观察培养的平板(黄色的菌落是大肠杆菌;蓝绿色或蓝色,产硫化氢,菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌)。,接种到三糖铁培养基上,恒温培养箱36±1℃,培养18-24h;典型沙门氏菌培养物斜面显红色(碱性),底端显黄色(酸性),有气体产生,形成硫化氢(琼脂变黑)。三糖铁培养基变化表肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果同时将三糖铁培养基上可疑的菌株,做生化实验,将可疑的沙门氏菌落分别接种于尿素、赖氨酸脱羧等发酵管中恒温培养箱36±1℃,培养18-24h(根据上表进行判定),将可疑的沙门氏菌补做进一步的生化试验,如下表:三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶培养基筛选三糖铁琼脂反应赖氨酸脱羧酶培养基可能的菌属斜面底层产气硫化氢KA+(-)+(-)+可疑沙门氏菌属KA+(-)-(-)+可疑沙门氏菌属AA+(-)+(-)+可疑亚利桑那菌AA+(-)-(+)-非沙门氏菌属KK+/-+/-+/-非沙门氏菌属备注:K--产碱;A--产酸;+--阳性反应,-—阴性反应,(-)少见反应,+/-—阳性或阴性反应三糖铁琼脂和尿素酶琼脂筛选三糖铁琼脂反应尿素酶琼脂可能的菌属斜面底层产气硫化氢KA+(-)+(-)-可疑沙门氏菌属AA+(-)+(-)-可疑亚利桑那菌KA+(-)+(-)+非沙门氏菌属AA+(-)+(-)+非沙门氏菌属KK+/-+/-+/-非沙门氏菌属备注:K--产碱;A--产酸;+--阳性反应,-—阴性反应,(-)少见反应,+/-—阳性或阴性反应沙门氏菌属反应序号生化项目反应沙门氏菌亚利桑那菌1尿素酶试验--2V-P试验--3氰化钾试验--4赖氨酸脱羧酶试验++5吲哚试验--6丙二酸钠试验-+7卫矛醇试验d-备注:+--阳性反应,-—阴性反应,d—反应不定A、靛基质反应接种后在恒温培养箱36±1℃,培养18-24h,形成红色表明是阳性反应;B、尿素反应接种后在恒温培养箱36±1℃,培养2-24h,发现颜色变红表明是阳性反应;沙门氏