人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch 通路信号分子表达的变化.pdf

文档介绍：生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2007, 59 (3): 267-272 267
研究论文
人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中 Notch 通路信号
分子表达的变化
邢莹 1,2,*,白瑞樱 1,2,鄢文海 1,3,韩雪飞 1,段萍 1,2,许燕 1,3,樊志刚 1
郑州大学基础医学院 1 干细胞研究中心;2 生理学教研室;3 病理生理学教研室,郑州 450052
摘要:本研究探讨 Notch 信号通路在人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells, hMSCs)体外增殖及向神经细胞分
化过程中的作用。采集健康自愿者骨髓,体外培养获得 hMSCs,取第 3 代 hMSCs,在诱导剂(β-ME, DMSO, BHA)作用
下向神经细胞分化。诱导后用免疫细胞化学鉴定神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)和尼氏体的表达以确
定诱导效果;用流式细胞术检测细胞生长周期时相的变化。在诱导前后,用免疫荧光和 RT-PCR 方法检测 Notch 通路中
Notch1 受体蛋白、配体 Jagged 1 (JAG1)、调节蛋白活化相关物早老素 1 (presenilin 1, PS1)、靶基因 hairy and enhancer of split
1 (HES1)信号分子表达的变化。结果显示:诱导前,处于 G0/G1 期的 hMSCs 占 %,S+G2/M 期的细胞占 %;诱
导后,G0/G1 期细胞比例升高,而 S+G2/M 期细胞比例下降,NSE 阳性细胞率达(77±)%,细胞质中可见深蓝色的块状
或颗粒状尼氏体。免疫荧光显示,诱导前后 hMSCs 内 Notch1 和 JAG1 均呈阳性表达,但 RT-PCR 检测发现诱导后 Notch1、
JAG1、PS1 和 HES1 mRNA 表达量较诱导前明显降低(均 P<)。结果表明,诱导 hMSCs 向神经细胞分化能抑制 Notch
信号分子表达,低水平的 Notch 信号激活可能有利于神经细胞的分化。
关键词:骨髓间充质干细胞;Notch1;JAG1;早老素 1 ;HES1;分化;神经细胞
中图分类号:R331
Expression changes of Notch-related genes during the differentiation of
human mesenchymal stem cells into neurons
XING Ying1,2,*, BAI Rui-Ying1,2, YAN Wen-Hai1,3, HAN Xue-Fei1,2, DUAN Ping1,2, XU Yan1,3, FAN Zhi-Gang1
1The Stem Cells Research Center; 2Department of Physiology; 3Department of Pathophysiology, College of Basic Medical Sciences,
Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China
Abstract: The N