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· 612 · 毒理学杂志 2008 年 6 月第 22 卷第 3 期 J Toxicol June 2008 Vol 22Π No 3
中图分类号:R994 3 文献标识码:A 文章编号:1002 - 3127(2008) 03 - 0216 - 03 ·实验研究·
三聚氰胺的毒性研究
林祥梅1 ,王建峰1 ,2 ,贾广乐1 ,梅林1 ,王众1
(1 中国检验检疫科学院动植物检疫研究所,北京 100029 ; 2 南京农业大学动物医学院)
关键词:三聚氰胺;细胞毒性实验;急性毒性;亚急性毒性实验;肾衰竭
2007 年 3 月中旬以来,美国发生4 000多起猫、狗行孔,继续培养 20 h 后加入 MTT ,每孔 20μl ,再培养 4
等宠物中毒死亡事件[1 2] 。美国食品药品管理局从进 h ,弃去液体后加入 100μl DMSO 震荡 10 min ,立即在酶
口的部分小麦蛋白粉和大米蛋白粉中检出三聚氰胺等标仪 570 nm 波长处测各孔 A 值。同时设对照组。重
成分。三聚氰胺多用于生产塑料和肥料,还可制造药复上述实验三次。
物胶囊[3 5] 。在动物饲料中添加三聚氰胺,可提高饲料细胞活力存活率% = ( (样品 A 值- 空白组 A
的氮含量,让人误以为该饲料的蛋白质比较丰富,但目值) (阴性对照 A 值- 空白组 A 值) × 100 %。
前还没有被认定有害人体健康,有关它和其他物质混 1 3 2 三聚氰胺的急性毒性试验:称取需要的三聚氰
合后对动物产生何种影响的资料报道甚少。本试验通胺量,用研钵研磨后加蒸馏水到所要求的浓度。选择
过对三聚氰胺的细胞毒性、急性毒性和亚慢性毒性研健康小鼠,采用灌胃方式从低剂量给药,每组 6 只小鼠
究,客观评价动物长时间接触该化合物的危害性,以及(雌雄各半) ,观察 48 h。小鼠死亡后剖解观察。
为中毒动物的治疗提供理论基础。 1 3 3 三聚氰胺的亚慢性毒性试验:将试验猫随机分
为 2 组,每组 3 只,按照美方提供的饲料中三聚氰胺含
1 材料与方法量为 2 4 g 进行添加,采用 30 d 连续喂养试验,并于饲
1 1 材料 BHK细胞(由中国人民解放军事医学科喂后第 6 、9 、15 、23 、30 d 采血做生化指标检查。实验结
学院提供) ;昆明小鼠,清洁级,体重 18 g~22 g ,雌雄各束后将实验猫处死,取肾脏固定于体积分数为 5 % 的
半, (购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中甲醛中 1~3 h ,常规石蜡制片。
心) ;成年健康猫(购自北京大学医学部实验动物中 1 4 统计学方法 IC50 是将细胞存活率对浓度对数作
心) 。
图,按作图法用 ED50 and IC50 FOR Graded Response (Ver
1 2 主要仪器与试剂三聚氰胺(北京化学试剂公
1 2 ,日本 H Ono 开发) 程序计算出 IC50 。
司) , DMEM 培养液, 胎牛血清( 美国 GIBCO 公司) ,
溶液