文档介绍：第一次微生物学实验准备工作及微生物接种技术
细菌革兰氏染色法
第二次细菌芽孢及荚膜染色观察
第三次细菌的运动性观察及细菌鞭毛染色法
第四次常见放线菌及霉菌观察
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一、微生物接种技术
一)、实验目的
学****微生物接种工具的使用,掌握无菌操作方法,建立有菌概念。
二)、实验原理
在微生物学实验或科研生产中,要经常地把一定种类的微生物菌种接种或移植到新鲜培养基中。由于我们接种的微生物都是纯种的,所以接种工作都必须在无菌环境下(在无菌室或超净工作台)进行,并严格遵守无菌操作技术。利用接种工具(如接种环、接种铲等)进行菌种的移植。因此无菌操作是接种培养微生物的关键。
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三)实验用品
接种环等接种工具、斜面培养基、酒精灯、酒精棉球
四)实验步骤:
1、接种工具的介绍
接种环、接种钩、接种针、接种圈、接种锄、玻璃涂棒、其他接种工具
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2、无菌操作要点
1)、要求建立“有菌概念”。
2)、接种时要有一个洁净的环境,整个操作过程必须在火焰旁进行。
3)接种环,棉塞一定要拿在手上,不能随便乱丢。
3、微生物接种技术
1)、斜面接种技术
从斜面菌种将菌移接至另一斜面培养基的方法,叫做斜面接种。
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接种方法:
A、接种前用酒精棉球擦净桌面;
B、将试管贴上标签,注明菌名、接种日期、接种人姓名等,然后用酒精棉球擦手消毒;
C、点燃酒精灯以后,在火焰旁将每一支试管内的棉塞稍微转一下,使其松动,以便在接种时易拔出,并将试管放在试管架上,放在接种台的右前方;
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D、将菌种和斜面培养基的两支试管,用大拇指和其他四指握在左手中,使中指位于两试管之间的部分,斜向上,并使他们呈水平位置,也可将试管横放在左手掌中央,用四个手指托住试管,大拇指压在试管上,斜面向上;
E、右手拿接种环,在火焰上将环的部分烧红灭菌,环以上凡在接种可能进入试管内的部分,均应通过火焰灼烧。(见图4)
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图4 接种环灭菌
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以下操作,需要使管口靠近火旁
F、用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞;
G、以火焰灼烧管口,灼烧时应不断转动试管口,使试管口沾染的少量菌得以烧死;
H、将烧过的接种环伸入菌种试管内,先将环接触没有长菌的培养基部分,使其冷却,以免烧死被接种的菌体,然后轻轻接触菌体,取出少许,慢慢将接种环抽出试管(图5),注意尽量不要使环的部分碰钉子到管壁,取出后不可使环通过火焰;
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图5 从一个试管移种到另一试管
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