文档介绍：两种功能单体制备柯里拉京分子印迹聚合物的比较
【摘要】优选合成柯里拉京(corilagin)分子印迹聚合物的功能单体。【方法】通过评价甲基丙烯酸和丙烯酰胺两种功能单体所合成的柯里拉京分子印迹聚合物的色谱表征,考察这两种聚合物对柯里拉京模板分子的印迹作用。【结果】以丙烯酰胺为功能单体得到的聚合物分子印迹效率高于甲基丙烯酸。【结论】丙烯酰胺是合成柯里拉京分子印迹聚合物的适宜功能单体。
【关键词】柯里拉京分离和提纯中药化学成分色谱法高压液相
分子印迹技术(molecular imprinting Technique,MIT)是近年来发展起来的一种合成对某一特定分子(模板分子)具有选择性的聚合物的方法,该聚合物称为分子印迹聚合物(molecular imprinting polymer,MIP)。由于MIP对目标化合物具有预定的选择性,与生物大分子相比,其制备简单,具有抗恶劣环境的能力,且耐酸碱、有机溶剂、高压等,表现出高度的稳定性和使用寿命长等优点,因此,近年来分子印迹技术飞速发展,在分离纯化、化学与生物传感器以及在药物分离和分析等方面应用广泛[1-5]。
柯里拉京(corilagin)亦称为云实精,是一种具有抗纤溶活性[6]、抗肿瘤[7-8]以及抑制乙肝病毒作用[9]的天然多酚类化合物,是叶下珠、老鹳草、蜜柑草等植物中的有效成分。柯里拉京分子印迹聚合物可用于从这些中药中萃取柯里拉京及其结构类似物。本实验以柯里拉京为模板分子,研究不同的功能单体制备的分子印迹聚合物的印迹效率。为进一步研究以该分子印迹聚合物为萃取材料,富集、萃取、分离复杂中药体系中的柯里拉京及其结构类似物提供了重要手段,这方面的研究工作尚未见报道。
1 材料
仪器 HP1100高效液相色谱仪(HPLC,USA),含一个四元泵、一个波长可调紫外检测器、一个真空在线脱气机和一个带有20μL进样环的手动六通阀;KQ100型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);Senco W201 B恒温水浴锅(上海申生科技有限公司)。
主要试剂丙烯酰胺(AA)、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)、偶氮二异丁腈(AIBN)均购自百灵威化学公司;甲醇、乙腈为色谱纯;四氢呋喃(THF)、甲基丙烯酸(MAA)、醋酸均为分析纯;液相色谱用超纯水为娃哈哈纯净水;柯里拉京购自北京格润得有限公司。
2 方法与结果
柯里拉京聚合物(MIP)及空白聚合物(NIP)的制备采用本体聚合方法。将模板分子(),溶于20mL致孔剂(:THF = 1:1)中,加入功能单体(丙烯酰胺或甲基丙烯酸,5mmol)、、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA,60mmol),超声波溶解混匀后,充氮气除氧3min,封管,60℃水浴反应24h,得到棒状聚合物。空白聚合物的制备方法同上,只是未加柯里拉京。不同功能单体制备的柯里拉京聚合物及其空白聚合物结果见表1。
MIP柱的制备将得到的棒状聚合物磨碎过筛(500目,30μ
m),颗粒小于30μm部份用丙酮反复沉降,以除去细末,得到的聚合物真空干燥。将所得聚合物干法装柱,×50mm 。将填好聚合物的柱子连接到HPLC系统中,分别用甲醇-醋酸(体积比为9:1)、甲醇为流