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肾综合征出血热病毒荧光抗体中和试验的建立及应用.pdf

上传人:peach1 2014/1/22 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:雾爹骣跫研究生签名:昊效导师研究生签名:灵敏刃肛年弓月,阳学位论文使用授权及知识产权归属承诺级学院领导盖章:海海海’二.‘曩河北医科大学河北医科大学研究生学位论文独创性声明本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。导师签勘,辏辉掳既
录目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.研究论文肾综合征出血热病毒荧光抗体中和试验的建立及应用前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯肾综合征出血热病毒抗体水平的血清学检测方法分析⋯⋯⋯⋯个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.刚舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..讨住结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..综述致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.
觳馍痉ǖ拿舾行浴⑻匾煨约拔榷ㄐ裕悍直鸩捎蒙痉ê心《局泻涂固宓募觳饧靶腞ḿ勖鸹钜呙缑庖咚狡兰郏粤活疫苗应用后的免疫效果,进而指导研的预防控制。肾综合征出血热病毒荧光抗体中和试验的建立及应用騌空斑减少中和试验目的:本研究旨在建立一种检测人血清中‘肾综合征出血热病毒血清中和抗体的实验室方法,即荧光抗体病毒中和试验伊,、州⒔ǜ梅椒ㄓτ糜诤颖笔〗】等群血清中肾综合征出血热鱟解河北省健康人群血清中嘌碨病毒中和抗体的水平及嗔薘ḿ勖方法:赴嘌菏褂肰瓻赴磍:,,以配好的细胞生长液悬浮,加發至孔细胞培养板的各孔内,放置于℃,细胞培养箱内培养,直至细胞长成单层。《疽旱南∈停合炔舛ㄊ笛橛貌《局甑腡缓蠼ú《疽合G灞瓯镜南∈停航笛槭冶4娴蘑双价灭活疫苗接种前后的血清标本作为待检血清,将待检血清市砑觳馇耙砸欢ū壤∈做断∈椭敝:。泻凸蹋航∈秃玫难G灞瓯居氲攘坎《疽夯旌希⒔ɑ旌弦置于℃,细胞培养箱内孵育。ɑ旌弦航又窒赴喝瓻赴焉こ傻ゲ愕紫赴养板,倒掉原有的细胞生长液,于对照及各检测孔内加入豯的血清病毒混合液,置于℃,细胞培养箱内培养。ü獾タ寺】固迦旧ḿ跋晕⒕迪鹿鄄欤河サ谋9潭ê螅入稀释至工作浓度的荧光标记抗单克隆抗体,吹干后在显微镜下对感染细胞进行观察并记录结果。琍法检测中文摘要摘要鰎释至“赣谩,
痉ǖ挠τ茫焊莺颖笔⌒腞囊咔榍榭觯≡个Ⅻ痉ǖ拿舾行越虾谩7直鸩捎蒙痉ḿ癙对盯法对份重复使用删法对份已检测为阳性的血清标本进行渭觳猓后血清份闹泻涂固澹ü冉狭街址椒ㄋ媒峁陨痉ǖ拿删法检测血清标本中心病毒中和抗体。法检测结果相同,表明删法具有较好的特异性。不同时间内份Ⅲ双价灭活疫苗免疫前后人血清渲忻庖咔把G荩庖高发县为疫苗接种点,在每个接种点选择~岁既往无心患病史、附法的特异性和稳定性较好。用齆法对份ḿ存在显著性的差异贸.,,表明莘ㄓ隤ㄏ啾让舾、烈法较稳定。抗体阳性率为.%,用捣ú獾玫闹泻涂固逖粜月饰ィ感性、特异性及稳定性进行检测。的健康人群,分瞿炅渥椋蟹植闼婊檠孔槌槿耍渤取观察对象恕2杉鄄於韵笠呙缃又智昂蟮难G灞瓯荆褂结果:又植《镜南赴ǘ鹊难≡瘢ü褂貌煌南赴ǘ冉惺验,只有当细胞浓度为~×资保谙晕⒕迪鹿鄄觳拍芸到分布均匀整齐的细胞,并且各细胞之间的界线清晰,所以只有这一区间浓度的细胞在用荧光抗体染色后才可在显微镜下观测到具有代表性的特异性荧光颗粒。本实验使用这一区间浓度的细胞来接种病毒。G宀《净旌弦褐泻妥饔檬钡幕肪程跫冉希蜒G宀《净旌弦放在℃,细胞培养箱内中和∈庇朐℃冰箱内中和过夜相比较,结果发现在姹淠谥泻凸沟幕旌弦航又窒赴笮纬傻挠ü饪帕多于℃条件下中和的混合液。因此本实验血清病毒液中和作用在℃,细胞培养箱内进行。Ⅷ、双价灭活疫苗免疫前后人血清渲忻庖咔把G荩庖吆笱G份闹泻涂固褰屑觳猓呙缑庖吆蟮难G逵肍ú舛ǖ闹泻性较好。灭活疫苗免疫前的人血清的中