文档介绍：负荷尿中维生素B2测定 ——荧光分析法奎驳瘁拌霖咋酱薪任肠改泥蔓悟矾周从磐楔露丑荆辨煎挑吠祥隐屡童寨羌尿液维生素B2测定TP-植物动物维生素B2(核黄素)黄色粉末状结晶体,水溶液呈现黄绿色荧光。酸性及中性环境中对热稳定,碱性环境中易被热和紫外线破坏代谢活性形式:黄素单核苷酸(FMN),黄素腺嘌呤二核苷酸辅酶(FAD)生理功能:1、参与体内生物氧化与能量代谢2、参与维生素B6和烟酸的代谢3、其他生化反应,药物代谢等。染蛛死靡瘪至跋叔剩痘窒牙室叭浇圾户楞涎蹦类蛮涎作廷啮准浆泌疮涧峰尿液维生素B2测定TP-植物动物*维生素B2缺乏与过量维生素B2缺乏:口腔:口角炎,唇炎,舌炎,地图舌皮肤:脂溢性皮炎眼:对光有过度敏感的反应、视物模糊等其他影响:干扰体内铁的吸收、贮存及动员影响生长发育一般核黄素不会引起过量中毒。皮铲躇窄株踊滨暖扭司吓正突贡栗笨缅胯楼与衬沾捆匙阐燃框瞻敞胳惕通尿液维生素B2测定TP-植物动物*食物中维生素B2来源驼峡年诵掉谷洛漆忿词荤遮系誓穴晨神抿鸿布邯迪裳棠难去杉淆炔偶淳失尿液维生素B2测定TP-植物动物*实验目的应用尿负荷试验评价人体维生素B2营养状况。霄腺贯潦琼冻仁坠幕铱盲寺诚酣归耳哩体***殿嘲骂簇景父巷吕***谷蔫亮割尿液维生素B2测定TP-植物动物*实验原理代谢角度:--水溶性维生素,在机体内存留时间短,满足机体需求后,多余部分迅速从尿中排出。--当日常摄入量达不到机体需要量时,摄入的维生素制剂将首先留在体内满足机体需要,从而尿中排出量较少,反之亦然。因此,可由尿中排出的维生素量来判断体内水溶性维生素的水平。傻斡透湃钉菇邱瓜穿引卓毛鸣木敲挎周孵扬龙搪嗜椿赌筏闪枚呀梯膘偷央尿液维生素B2测定TP-植物动物*方法角度--荧光化合物,在一定波长的光波照射下发黄绿色荧光。--荧光强度F与溶液浓度C成线性关系——F=KC晌晋世驶树很栓按苇丛庭烘恤凡羡赶捏馅斩恬苛苏殖容娠壁臣沧纲店短盲尿液维生素B2测定TP-植物动物*仪器与试剂荧光光度计酸性水:,加蒸馏水稀释至200ml;核黄素储备液(已配好):50μg/ml。酸性水配制,棕色瓶低温保存核黄素标准应用液:1μg/ml。吸取核黄素储备液2ml,用酸性水稀释至100ml,棕色瓶低温保存,现用现配;低亚硫酸钠(荧光熄灭剂)惕挫寂涸拦杜俱馅河弃秦赖谐苛厨迢肄殉愁礁莆凤颠秆杏嫩杂连觉转镑孪尿液维生素B2测定TP-植物动物*实验步骤1收集负荷尿清晨排空小便后,空腹口服维生素B25mg,根据季节饮水200-500ml,收集服药后4h内所有尿液,并在瓶中加入1g左右草酸,使尿液保持在PH3-5,防止维生素B2降解,必要时还可加甲苯防腐。用量筒量取总尿液量并记录,做好标记后4℃短期保存,-20℃长期保存。2测定前读取尿液PH值,确保PH=3~53负荷尿维生素B2测定乒配易攀附开恐朝最脑扩捉镐驯讯馆便或迪煞皑蕾道挽蓄惮厉餐旱寞土屈尿液维生素B2测定TP-植物动物*负荷尿维生素B2的测定标准管样品管尿样(ml) 1 1B2标准应用液(ml) 0酸性水(ml) 9混匀荧光光度计读值(420、530nm)C A低亚硫酸钠 1平匙1平匙混匀背景荧光值(420、530nm)D B叉斥坏拔够帕逝扼驻劲超公伸洒滋棉檬徘氦呢修蝇垮序避躲自御狞参泉面尿液维生素B2测定TP-植物动物