文档介绍：▲■●■,.▲■■氨基酸类阳离子脂质体的合成及其基因转染效率评价指导教师姓名、职称盆壅茎塾撞综已涡亡俗産二零一一年五月湖南师范大学学位评定委员会办公室分类号学校代码密级学号
摘要基因治疗在肿瘤治疗和遗传病治疗方面有很好的前景,引起了广泛关注。基因治疗面临的最主要的难题是寻找一种高效、低毒的基因转染载体,将基因药物导入特定的细胞中,并能稳定地维持其功能。目前,基因载体一般分为病毒载体和非病毒载体。而阳离子脂质体是非病毒载体中最有潜力的基因载体之一。本论文以氨基酸为原料,经月桂醇或正辛醇的酯化反应、氯乙酰氯酰胺化反应和季铵化反应,合成了一系列包括瓹、在内的八种氨基酸类阳离子脂质。采用超声波分散技术,用二次蒸馏水将自合成的阳离子脂质分散成阳离子脂质体,再将脂质体与质粒混合制备成脂质体/质粒复合物。用激光粒度仪测定了各阳离子脂质体和脂质体/质粒复合物的平均粒径、粒径分布和电位。调节复合物的疨比,使’电位与平均粒径等物理结构参数满足最佳的细胞转染条件。以制备的各种阳离子脂质体为基因载体,装载质粒,对细胞进行体外细胞转染实验,并采用商用转染试剂醒粜远哉铡J笛榻峁砻鳎梢丙氨酸、沌影彼帷广甲硫氨酸和甘氨酸制备的含单一疏水长链的阳狢狢、·、瓹、瓹甅.—.
磁、耶、、、、离子脂质体珻甪瓹、瓹籚.....狢,不论任何疨比都没有转染效率。而含双疏水长链的阳离子脂质体却具有较好的转染效率,.;蛟靥澹霸谽柿#、。用ḿ觳飧弥侍宓南赴拘浴J笛榻峁明,,甚至优于,是一种广谱、高效和低毒的基因转运载体。关键词:基因治疗,基因载体,阳离子脂质体,氨基酸,基因转染率。
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯基因治疗简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一基因治疗载体简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯阳离子脂质类载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章氨基酸类阳离子脂质的设计与合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯阳离子脂质分子的设计⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.试剂与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.谷氨酸类阳离子脂质的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯儿.
缬氨酸类阳离子脂质的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第三章阳离子脂质体纳米粒子、脂质体/春衔锏闹票讣捌湫能测试⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.试剂与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...衾胱又侍迥擅琢W拥牧>⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..蔖本/春衔锏牧>逗捅砻娴缥徊舛ā第四章氨基酸类阳离子脂质体/春衔锏奶逋饣蜃H居攵拘研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯主要试剂与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..
籵,’ぁぁぁぁぃぁぁぃぃぃ......................................琔实验内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..湖南师范大学学位论文原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。湖南师范大学学位论文版权使用授权书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...