文档介绍：第二章基因操作的主要技术原理
基因操作技术主要包括
(1)DNA分子的切割、连接、转化
(2)核酸分子杂交,凝胶电泳以及序列分析,基因的人工合成,PCR扩增等
第一节核酸的凝胶电泳
第二节核酸分子杂交
第三节细菌的转化
第四节 DNA序列分析
第五节基因扩增
第六节基因的定点诱变
第七节蛋白质与DNA相互作用的研究方法
第一节核酸的凝胶电泳
一、核酸的凝胶电泳(Agarose & Polyacrylamide)
1、简介
将某种分子放到特定的电场中,它就会以一定的速度向适当的电极移动。
某物质在电场作用下的迁移速度叫作电泳的速率,它与电场强度成正比,与该分子所携带的净电荷数成正比,而与分子的磨擦系数成反比(分子大小、极性、介质的粘度系数等)。
在生理条件下,核酸分子中的磷酸基团是离子化的,所以DNA和RNA实际上呈多聚阴离子状态(Polyanions)。将DNA、RNA放到电场中,它就会由负极→正极移动。
2、琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶: 琼脂糖是从海藻中提取处理出来的一种线性聚合物。
(1) 琼脂糖——海藻中提取的线性高聚物,电泳中EB染色,紫外灯下1ngDNA可以被检测到
分离作用依赖于DNA的分子量及构型
凝胶的种类及浓度对被分离的DNA的分子大小有影响
琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡过程中
DNA Ladder的形成
PCR产物的琼脂糖电泳