文档介绍：215例血液病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性结果分析
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【摘要】目的研究中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性测定在血液病鉴别诊断中的应用价值。方法采集215例血液病患者和30名健康人的静脉血制备血涂片,经Kaplow偶氮偶联法进行NAP细胞化学染色,显微镜油镜观察100个成熟中性粒细胞,以五级积分值记录结果。结果急性淋巴细胞白血病(ALL)、类白血病反应(LR)、再生障碍性贫血(AA)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM),真性红细胞增多症(PV)6组疾病NAP积分明显高于对照组() ;CLL、恶性组织细胞病(MH)、骨髓增生异常综合征(MDS-RAEBT)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)4组疾病NAP积分明显低于上述6组疾病和对照组();AML NAP积分略低于对照组,但差异无显著性(),与ALL比较差异有高度显著性()。结论 NAP活性测定可支持血液病的鉴别诊断。
【关键词】碱性磷酸酶;血液病
碱性磷酸酶主要见于成熟中性粒细胞、网状细胞和吞噬细胞,其他细胞皆为阴性反应。总结我院血液科215例血液病人的中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性观察,进行对比分析,以探讨NAP在血液病中鉴别诊断的应用价值。
1 资料与方法
一般资料本组215例血液病均来源于我院血液科2002~2007年经骨髓涂片细胞学分析、病理检查及有关实验室检查并结合临床参照文献[1]确诊病例,其中再生障碍性贫血(AA)47例、骨髓增生异常综合征(MDS-RAEBT)5例、真性红细胞增多症(PV)4例、急性髓细胞白血病(AML)69例、急性淋巴细胞白血病(ALL)50例、恶性组织细胞病(MH)3例、类白血病反应(LR)13例、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)4例、慢性粒细胞白血病(CML)13例、多发性骨髓瘤(MM)4例、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)3例。健康人群30例为对照组,其中男18例,女12例。患者和健康人群均采集静脉血制备血涂片2张。
试剂 Kaplow 偶氮偶联法:①固定液:25%甲醛乙醇溶液;②丙二醇缓冲液: mmol/L 2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇溶液();③基质孵育液(-):α-磷酸萘酚钠20mg溶于缓冲液20ml,再加入坚牢蓝RR 20mg;④苏木素复染液。细胞染色方法:新鲜血片用固定液冷固定(4~10℃)30s,水洗、晾干后放入基质孵育液(按上述方法新鲜配制)中,37℃温浴30min,流水冲洗,晾干后苏木素复染液复染5min,水洗、晾干。显微镜油镜观察100个成熟中性粒细胞,按每个细胞浆内颗粒多少分成五级:(-)、(1+)、(2+)、(3+)、(4+),用半定量记分法,以积分值记录结果[2]。
统计学处理计量数据以±s表示,应用SPSS ,行单因素方差分析,以α=。
2 结果
对照组与血液病患者NAP积分结果对比 AA、LR和ALL等的NAP积分显著高于对照组;MDS-RAEBT、CML、MH、PNH的NAP积分明显低于对照组,其中MH和CML的NAP积分最低;AM