文档介绍：红树植物红海榄中多糖的提取及其组成的研究
【摘要】目的对红树植物红海榄中多糖的提取及其组成进行研究。方法红海榄叶经热水浸提、Sevage法脱蛋白等方法得到多糖;经完全酸水解,糖腈乙酸酯衍生化,并用红外光谱仪、气质联用仪对其结构和组成进行了研究。结果红海榄多糖由赤藓糖、D-阿拉伯糖和葡萄糖组成,它们的摩尔比为5∶1∶17。结论红海榄多糖为杂多糖。
【关键词】红海榄; 多糖; 提取; 组分
多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物,它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子,是维持生命活动正常运转基本物质之一。近年来,国际上对药用红树植物的化学成分及其药理研究表明,红树植物具有抗艾滋病、抗肿瘤、抗氧化等活性[1]。尽管红树植物在世界上分布广泛,含有大量活性先导化合物可治疗人类重大疾病,但这一类植物资源在某些方面并未真正得到研究、开发和利用,尤其是其药用价值未得到应有的重视。本实验对红树植物红海榄中的多糖进行提取并对其组成进行了研究。
1 材料与仪器
原料红海榄叶(采自湛江东海岛),洗净剪碎,置于通风处阴干,备用。
试剂95%乙醇;无水乙醇;氯仿;正丁醇;丙酮;无水乙醚;硫酸;碳酸钡;吡啶;盐酸羟胺;乙酸酐,以上试剂均为分析纯。
仪器E-5299旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限责任公司);SHB-B95A型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);GCMS-QP2010气相色谱质谱连用仪(岛津制作所);HH-S2系列恒温水浴锅(江苏省全坛市环宇科学仪器厂);FTIR-8400S型红外光谱仪(日本岛津公司);ESJ120-4型电子天平(沈阳市龙腾电子有限公司);202-2型干燥箱(上海市实验仪器总厂);GSP-84-02型磁力恒温搅拌器(山东电讯七厂)。
2 方法
多糖提取称取粉碎、干燥好的红海榄叶150 g,加入1 500 ml蒸馏水,超声处理20 min后加热到90 ℃,热水浸提3次,过滤,合并,得棕色滤液。用旋转蒸发仪在浓缩滤液至50 ml,抽滤去沉淀,加入3倍体积的95%乙醇沉淀多糖,于冰箱放置过夜,得棕色絮状物,离心收集沉淀。
Sevag法去蛋白[2]Sevag试剂的配制:用氯仿与正丁醇以4∶1混合。
上述沉淀加水溶解,即得棕色溶液,加入溶液1/3倍体积的Sevag试剂,剧烈振荡至无白色絮状物析出,然后离心,除去水相与有机相交界处的变性蛋白,剩余液体再加入200 ml无水乙醇,充分振荡摇匀,于冰箱静置24 h,得棕色絮状物。离心收集沉淀,沉淀经无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤两次脱去脂肪和色素,干燥, g。
红外光谱法(IR)鉴定多糖采用KBr压片制样,在4 000~400 cm-1区间内用红外光谱仪扫描IR吸收。
多糖水解[3]称取30 mg粗多糖,加入5 ml 30 mmol/L的硫酸溶液,封管,超声片刻,至多糖完全溶解,100 ℃恒温水浴振荡2 h。将试管置于烘箱中于110 ℃反应6 h后冷却至室温,加BaCO3粉末中和、离心、 g。
糖腈乙酸酯衍生物的制备称取10 mg单糖样品和10 mg盐酸羟胺,用20 ml吡啶溶解