文档介绍：DPPH法测定沙棘籽原花青素清除自由基的能力
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作者:孙涛付雪艳张蓓董琳
【摘要】目的研究沙棘籽原花青素体外抗氧化活性。方法 DPPH法测定沙棘籽原花青素抗氧化、清除自由基能力。结果沙棘籽原花青素抗氧化、清除自由基能力略低于抗坏血酸,清除DPPH /kg,。结论沙棘籽原花青素具有抗氧化活性。
【关键词】沙棘籽原花青素 DPPH
沙棘是胡颓子科,多年落叶乔木或灌木,能防风固沙、保持水分、改良土壤,具有优异的生态效益[1]。主产于我国内蒙、宁夏、青海等地,不仅是西部生态治理的优选植物,而且具有很高的药用价值,被誉为“高原圣果”。近年来国内外根据沙棘果实的传统用药,将鲜果开发出沙棘果汁、沙棘口服液、沙棘油等产品,但是作为沙棘果实加工业副产品的沙棘籽,还没有被有效的开发利用。国内外研究表明不同沙棘籽提取物具有抗氧化作用,沙棘籽总黄酮有直接捕获超氧自由基和羟自由基,清除大鼠体内自由基的作用[2-3]。而沙棘籽还富含原花青素[4],原花青素(Proanthocyanidins)是由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成的黄烷-3-醇衍生物的总称。目前对沙棘籽原花青素清除自由基的作用研究未见相关报道,为此本文对沙棘籽原花青素进行体外抗氧化作用的研究。
1 材料与方法
实验材料 UV-2550紫外分光光度计(日本岛津),FW110型高速粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司),RE-F20旋转蒸发仪(长城亚荣生化仪器厂),AE240十万分之一电子分析天平(瑞士梅特勒);DPPH标准品(美国SIGMA公司),抗坏血酸(分析纯,广州化学试剂厂,批号20061108-1),儿茶素标准品(中国药品生物制品检定所),其余试剂均为分析纯。沙棘籽采自宁夏六盘山,经隆德县林业局鉴定为中国沙棘亚种( Rousi)。
实验方法
DPPH法测定原花青素抗氧化、清除自由基的原理
二苯基苦味肼基自由基[DPPH·]是一种稳定的以氮为中心的自由基,在517nm波长处有最大吸收。[DPPH·]乙醇溶液呈紫色,其浓度与吸光度呈线性关系。在[DPPH·]乙醇溶液中加入原花青素后,原花青素可以与[DPPH·]结合或发生替代,使[DPPH·]数量减少,溶液颜色变浅,表现为:其在517nm波长处的吸光度不断减小,直至达到稳定。因此,可以通过在517nm 波长处检测原花青素对[DPPH·]自由基的清除效果,计算其抗氧化能力。
DPPH标准曲线的制作
,乙醇定容至100mL,,置4℃冰箱中保存备用。分别吸取1、、、5、10mL标准溶液,乙醇定容至10mL,517nm测其吸光度,以浓度C为横坐标,以吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为A=+,R2=
沙棘籽提取物的制备
将干燥的沙棘籽用高速粉碎机粉碎处理,过100目筛,称取适量,石