文档介绍：HER2在结直肠癌中的表达及意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:张凯王中义李春生李红刘铜军
【摘要】目的研究HER2在结直肠癌的表达及意义。方法应用pathway array analysis方法分析了56例结直肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中HER2的表达。结果在56例结直肠癌患者中共发现HER2阳性表达35例,21例正常黏膜组织中HER2过表达,其中16例结直肠癌患者有淋巴结转移。结论 HER2的表达与结直肠癌的发生发展相关,检测HER2的表达可作为判断结直肠癌的生物学行为和预后的重要指标。
【关键词】结直肠癌;HER2;pathway array
国内外研究表明,ErbB2及表皮生长因子受体与多种肿瘤相关〔1〕。已发现在人类肿瘤的改变包括基因扩增导致受体表达、激活激酶域突变主要集中在表皮生长因子受体,并且ErbB2在表皮生长因子受体的胞外域〔2~4〕在基因框架中缺失,每一种改变都可以导致受体的持续激活从而促进癌症的发展。针对HER2的单克隆抗体及小分子抑制剂(贺赛汀)已经在乳腺癌及非小细胞肺癌等的治疗中广泛应用,但是在结直肠的应用鲜有报道。本实验采用pathway array analysis方法研究HER2及其信号通路在结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中的表达,探讨HER2表达变化与结直肠癌发生、病理类型及预后的关系。
1 材料与方法
材料
标本来源
收集手术切除结直肠癌标本56例,其中高分化腺癌16例,中分化腺癌21例,低分化腺癌12例,黏液腺癌7例。同时取这些病例标本癌旁正常黏膜组织作为对照。所有标本在取材后20 min内迅速置于干冰上,而后再转入-70
℃冰箱中进行低温保存。
抗体
106种抗体均购于Sigma及Cellsignal公司。pPKCα(Ser657)/pEGFR (Tyr1068),pHER2/ErbB2 (Tyr1221/1222)/pPDK1 (Ser241),pPKC α/βⅡ(Thr638/641)/pp53 (Ser392),pAKT (Ser473)/pPTEN (Ser380),pRB (Ser780)/pSurvivin,pbetacatenin(Ser33/37/Thr41)/pstat5(Tyr694),pStat3 (Ser727)/pERK,Thr202/Tyr204)(P44/42)pcKit (Tyr719)/pEGFR (Tyr1148),pp70 S6 Kinase (Thr389)/pVEGFR Receptor 2 (Tyr951)pFGFR (Tyr653/654)/peIF4B (Ser422),pHGF R,cMET (Y1234/Y1235)/pSmad (Ser463/465)pERK5 (Th
r218/Tyr220)/pp90RSK (Ser380),pHGF R/cMET (Y1003)/pCREB (Ser133),pmTor (Ser2448)/pPKCδ(Thr505),pIKB (Ser32)/pIGF1 R / Insulin R (Tyr1131/Tyr1146),pcdc2 (Tyr15)/pcJun (Ser73),pRb (Ser807/811)/pSAPK/JNK (Thr183/Tyr185),pFLT3(Tyr 591)/pp38 (Thr180/Tyr182),Protein marker (Invitrogen)+IgG (25ng)cyclin B1/cyclin D1,Cdk6/cdc25B,cyclin E/cdk2,p27/BRCA1,Cdk4/Neu,1433 Beta/cPKCαERK/EGFR,Wee1/Cdc25C,Hsp90/CHK1,MDM2/cdc2 p34,E2F1/PCNA,cmyc/FGFR3 (B9)Notch 1/betacatenin,Akt/Trap,×IAP/Bcl2,ETS1/HIF1α,HIF2α/TTF1,p53/Notch4 (L5C5)PTEN/SRC1,p300/ckit,Ba×/Ncadherin,raf1/PCNA,cdc42/Eif4b,βactin/betatubulin/GAPDH, TNFα/Vimentin,OPN/Survivin,Ecadherin/TGFβ,p16/p27,WT1/Mesothelin,Cleaved Caspase3/CO×2,CREB/ATF1,p21/NFkB52,NFk