第六章++转基因动物.ppt

文档介绍：第六章转基因动物
湖南师范大学生命科学学院
袁婺洲
本章目录
动物转基因技术
显微注射法
逆转录病毒法
胚胎干细胞法
精子载体法
体细胞核移植法
提高转基因效率的策略
转基因动物的应用
转基因动物在生命科学基础研究中的应用
转基因技术在动物育种中的应用
转基因动物在医药科学研究中的应用
转基因动物研究存在的问题及展望
转基因动物的概念
借助基因工程技术把外源目的基因导入动物的生殖细胞、胚胎干细胞或早期胚胎,使之在受体染色体上稳定整合,并能把外源目的基因传给子代的个体,叫转基因动物(transgenic animals)
1982
第一节动物转基因技术
1 显微注射法
2 逆转录病毒法
3 胚胎干细胞法
4 精子载体法
5 体细胞核移植法
一. 显微注射法
在显微镜下将体外构建的外源目的基因,用注射针注射到动物受精卵中,使之与动物基因组整合,从而得到转基因动物的方法。
1、目的DNA的准备
构建目的基因的表达载体:目的基因应包含完整的ORF,顺式调控序列,加尾信号。
线性DNA分子的准备
DNA浓度:1-3μg/ml .
2、小鼠的准备和要求
超排受精卵的准备:
选择4-6周龄的小鼠,用孕马血清促性腺激素素(PMSG)和人绒毛促性腺激素(hCG)先后进行腹腔注射,做超数排卵处理;
注射后10-13小时超排卵,每个母鼠与一个公鼠交配。
假孕母鼠的准备:
通过注射PMSG和hCG诱导产生,再与结扎的公鼠交配。