文档介绍：儿童急性感染人类偏肺病毒的诊断及临床分析
摘要:目的:总结人类偏肺病毒急性感染患儿的诊断经验和临床特点。方法:采用直接免疫荧光法对79例急性感染人类偏肺病毒的婴幼儿进行快速诊断,及时给予抗病毒治疗及对症治疗。结果:79例患儿,临床诊断为肺炎22例,支气管肺炎18例,毛细支气管炎17例,急性支气管炎11例,喘息性疾病如哮喘、喘息性支气管炎等11例,全部患儿痊愈,未出现并发症,病程5~21 d,平均住院天数8 d。结论:采用直接免疫荧光技术检测人类偏肺病毒抗原,操作和实验方法简便,诊断快速准确,有利于早期病因治疗,缩短病程,具有重要的社会经济效益。
关键词:婴幼儿;人类偏肺病毒;直接免疫荧光;诊断
呼吸道病毒是婴幼儿冬春季感染性疾病的主要病原,研究表明以呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒(Inf) 较常见,但是有部分患者仍无法确定其病原。人类偏肺病毒(Human metapneumovirus,hMPV) 归属于副黏病毒科偏肺病毒属,是偏肺病毒属里的第一个被发现能够引起人类致病的病原体。它可以部分解释以前不能诊断的病例,无疑减少了呼吸道感染中病原未明者的比例,同时也提示了要重新对各种呼吸道病毒在呼吸道感染中的作用进行评估,对完整认识儿童呼吸道感染的病毒病原谱是很好的补充。分析浙江大学医学院附属儿童医院收治的79例hMPV感染的患儿资料,总结相应的诊断经验和临床特点,以期早诊断,早治疗,缓解症状,减少交叉感染机会。
1 资料与方法
一般资料:选取2010年10月~2011年1月间因急性呼吸道感染入院治疗的患儿,共计864例,年龄1个月~14岁,中位年龄2岁。诊断参照《实用儿科学》的相关标准[1]:①急性起病;②临床表现为咳嗽、咯痰或发热等呼吸道症状;③X线及实验室检查符合呼吸道感染征象。
诊断方法:入院24 h内即采用无菌负压抽取痰液法,将塑料导管经患儿鼻腔插入7~8 cm达到咽部以下,吸取鼻咽部分泌物1~2 % NaCI溶液吸瓶中送检,样本置离心管中用漩涡混合器震荡成悬液,1 500 r/min离心10 min,弃上清液和黏液层,沉淀物加适量PBS调整至适当细胞浓度,微管吸取上述纤毛柱状上皮细胞悬液制作细胞片,在样片上点样,每点加25 μl细胞悬液,自然干燥,冷丙酮固定10 min,风干。在样片和对照片的每个细胞点加l滴hMPV荧光抗体,37℃温盒孵育30 min,用洗涤液洗涤后加1滴封闭液,封片后在荧光显微镜下观察结果。D3-DFA hMPV抗原免疫荧光检测试剂盒购自美国DHI公司,以上步骤均按说明书进行操作,采用试剂盒内阳性和阴性对照标准,并按阳性标准(200倍显微镜下每视野找到≥2个绿荧光细胞即为阳性)判断结果。荧光显微镜为日本Olympus BX60。
2 结果
对864例患者的痰液标本进行hMPV抗原检测,有79例呈阳性,%,被hMPV病毒感染的上皮细胞均显示典型的绿色颗粒状荧光。79例患儿中,男52例,女27例,男女比例约为2:1,年龄2个月~4岁3个月,中位年龄10个月,其中≤2岁的患者占90%。入院后体温高热(39℃以上)2例,中等热(38℃~39℃)29例,低热(38℃以下)40例,体温正常8例, d。实验室检查,白细胞计数大部分在正常范围或偏低,咽部