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山东农业科学,:~
大白菜软腐病抗性的分子标记筛选
牟晋华,徐文玲,张一卉,王翠花
山东省农业科学院蔬菜研究所,山东济南
摘要:本试验以抗、感软腐病的大白菜材料为亲本,以其:代分离群体为试材,采用分析技术结
合分组法,以引物组合筛选出一个的与感病基因连锁的标记;利用获得的分子标记对
代分离群体进行了分子鉴定。结果表明:分子标记与抗性鉴定结果具有很高的一致性,证实了所筛选出的标
记基因应用于抗性鉴定的可行性。
关键词:大白菜;软腐病;分子标记;
中图分类号:;.. 文献标识号: 文章编号:

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,用优势致病力菌株对代的
于中国,在亚洲地区已经成为人们的主要蔬菜之各单株进行人工接种抗性鉴定。采用分子
一
。近几年来,随着保护地栽培技术的发展和反标记技术结合法选取极端抗病和极端感病
季节大白菜品种的育成应用,菜地连作现象普遍, 的单株,分别构建三对抗感基因池,筛选与大白菜
致使大白菜“三大病害”之一的软腐病发生与发抗软腐病基因紧密连锁的分子标记,以期应用于
展呈现上升趋势,对大白菜的丰产稳产构成很大大白菜软腐病的抗性鉴定。
威胁,抗软腐病已成为大白菜抗病育种的重要目
材料与方法
标。鉴于大白菜资源中缺少软腐病的抗源材料以
及对其抗病机制、鉴定方法研究不全面,导致软腐. 供试材料
病的抗病育种一直是大白菜育种上的重大难题。供试大白菜材料“”和“”由山东省农
在传统的育种材料筛选过程中,程序繁琐,周期业科学院蔬菜研究所大白菜育种研究室提供。
长,且易受环境影响。因此,分子标记筛选技术的. 方法
建立对种质资源的抗病性鉴定,加速大白菜抗病.. 抗病性鉴定亲本材料及代分离群体
育种进程具有重要意义。采用张光明的苗期抗性鉴定方法;病情
本试验以抗病材料“”和感病材料“”调查采用“九五”国家攻关组大白菜软腐病苗期
收稿日期:——
基金项目:国家支撑项目“优质多抗专用大白菜育种技术研究及新品种选育”一叭一和国家项目“优质多抗
蔬菜和果树分子育种技术与品种创制”——。
作者简介:牟晋华一,女,硕士,助理研究员,主要从事大白菜育种研究。· 通讯作者,—:. 。
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山东农业科学年
抗性鉴定病情指数分级标准。轮;接着按下列参数扩增轮:℃,
.. 基因组的提取和检测采集幼嫩的℃,;延伸。
叶片用自来水冲洗干净备用。的提取采用④电泳及银染:试验使用测序电泳系
传统的法,稍加改进。用紫外分光光度计统,以%变性聚丙烯酰***凝胶电泳,染色采用银
和琼脂糖凝胶电泳法检测的纯度和含量。染,参照等的方法。上样前
.. 抗感基因池构建本试验采用恒功率预电泳,上样后恒功率电泳,
法分别构建抗病池当二甲苯青指示剂到达胶板底部/处时停止电
和感病池。借鉴韩和平等的方法采用泳,耗时约。电泳结束后将胶板浸入%冰
不同单株的预扩增产物构建相应的抗感池,用于醋酸中固定,轻摇至染料消失;然后用去离子水冲
引物的筛选,另外抗病亲本和感病亲本的洗次每次,再放进染色液.%
采取多株混合采样然后提取的方法。,,.% ,轻摇染色,