文档介绍：QCA/QC-SOP05-003  山东良福制药有限公司起草人 日期 浮游菌测试操作规程审核人 日期 批准人 日期 第05版实施日期 总页数共7页      主题内容和适用范围本规程规定了公司洁净室(区)中浮游菌的测试条件,测试方法及控制标准。本规程适用于公司洁净室(区)浮游菌的测定和洁净度等级的验证。相关文件《药品生产质量管理规范》         2010年版《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》 GB/T16293—2010术语洁净室(区)对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用,均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。洁净工作台一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体,如垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。菌落细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU。通常用个数表示。浮游菌用本规程提及的方法收集到的活微生物粒子,通过专用的培养基,在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。浮游菌浓度单位体积空气中含浮游菌菌落的多少,以计数浓度表示,单位是个/m3或个/L。静态测试洁净室(区)净化空气调节系统已处于正常运行状态,工艺设备已安装,洁净室(区)内没有生产人员的情况下进行的测试。动态测试洁净室(区)已处于正常生产壮态下进行的测试。职责中心化验室微生物限度检查室人员负责浮游菌的定期检测工作。质量标准环境菌落监测标准区域内容D级洁净区万级洁净区百级洁净区标准cfu/平皿≤200平均≤100平均≤1警戒限度cfu/平皿1602---------测定频次1次/季1次/日1次/班说明D级区平皿菌落数平均不得超过200个。     材料与设备设备浮游菌采样器、净化工作台、恒温培养箱、烘箱、高压蒸汽灭菌器、放大镜、显微镜、电冰箱、菌落计数器。用具培养皿(平皿):?90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。钢精锅:10000ml。三角瓶:300ml。天平、称样纸、勺。此外还需要棉塞、牛皮纸、线绳、微波炉、玻璃棒、海棉擦、毛刷等用具。空白培养皿的准备包扎取洁净、干燥的培养皿用牛皮纸或专用包皮布包严扎紧待灭。灭菌灭菌采用湿热灭菌法。条件:、121℃,20min。灭菌时要注意按照操作规程操作高压蒸汽灭菌器。传输将灭菌并用余热烘干后的平皿,传至准备间,并用紫外线照射备用。空白平皿一般在注皿前24小时内灭菌,传入。质量要求已备好待用的平皿应确保无损、无污、无菌、干燥。培养基的准备及灭菌大豆酪蛋白琼脂培养基制备。取大豆酪蛋白琼脂培养基约34g,加蒸镏水1000ml加热溶解即得。溶解与分装培养基配制好后,分装入洁净干燥的300ml三角瓶内,约200ml/瓶,并塞好棉塞,扎上牛皮纸帽,待灭。培养基的灭菌采用湿热灭菌法。除另有规定外,,121℃,20分钟。注意:灭菌结束后自然降压,以防培养基在突然降压后沸腾。注皿无菌室应整洁、有序,各用具处于定置状态。注皿前对无菌室作适当消毒和清洁,并开紫外线照射30分钟。把准备好的空白平皿去掉牛皮纸,放在工作台上,按每若干个为一组摞齐摆好。灭菌的培养基,加热溶化传入无菌室,用75%酒精擦试瓶体后,放在工作台上,打开紫外线照射,待其冷至45℃左右时,开始注皿。注皿操作操作员消毒手,做房间和工作台环境皿。操作员在符合100级空气洁净度条件的层流净化工作台上将培养基注入培养皿。注入量:?90mm培养皿15ml。注皿时,三角瓶倾斜,把皿盖微微打开(不超过45O角),将培养基注入皿中,动作尽量快、稳、轻。将注好的平皿,每若干个为一摞排放整齐,用浸有75%酒精的绸布盖上,打开紫外灯照射待凝。凝固后,平板倒过来,收入筐内,包好,放培养箱中预培养,30~35℃,48小时,看培养基本身是否染菌。质量要求:制备好的培养皿(基),经48小时培养后,无菌生长方可进入待用状态。若长菌培养皿大于该全部培养皿的10%,视为该批培养基不合格。应倒掉重新配制。用具的洗涤用后培养皿的清洗使用后,先用海棉擦沾水和洗衣粉擦去皿盖上的记号,然后铲出培养基,用海棉擦或毛刷蘸洗涤剂在温水中洗干净,用自来水冲四、五次,再用蒸镏水冲洗2~3次,烘干,备用。用后三角瓶和钢精锅的清洗。使用后,先用热水烫洗1~2次,然后用毛刷蘸洗涤剂刷洗干净,用自来水冲四、五次,再用蒸镏水冲洗2~3次,晾干,备用。测试方法测试方法本测试方法通过带浮游微生物空气高速通过微孔,被均匀撞击在培养皿内的琼脂表面;这些活体微生物在琼脂表面获得均匀和充分,在培养过程中,快速发生动态再水化过程,高速生长,从而更快得出结果。在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室(区)的洁净度。培养皿选用?