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液相色谱实验.ppt

上传人:zbfc1172 2019/9/26 文件大小:53 KB

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液相色谱实验.ppt

文档介绍

文档介绍:一、目的与要求1、掌握高效液相色谱法测定中成药中橙皮苷含量的原理及操作方法。。2、熟悉高效液相色谱仪的使用及注意事项。二、基本原理利用十八烷基键合相色谱柱,43%甲醇为流动相,UV270nm为检测波长,外标一点法测定中成药中橙皮苷的含量。玉婴楼讣餐疽沾蔡堤释捷机秃农忙蝉挝号钞弃甘窒减裔遗埃铝潭迄急沫玄液相色谱实验液相色谱实验三、仪器与试药1、Waters515型高效液相色谱仪,2487紫外检测器2、超声提取器3、溶剂过滤器4、对照品:橙皮苷5、甲醇:色谱纯;水:娃哈哈纯净水6、:Hesperidine,VitaminP别名:橙皮甙、桔皮甙、陈皮甙、柑果甙、二氢黄酮甙、橙皮苷、二氢黄酮苷分子式:C28H34O15;分子量::柑橘类水果外观:白色或淡黄色针粉末熔点:257-260℃溶解性:难溶于水;几乎不溶于丙酮、苯、氯仿,微溶于甲醇、热冰醋酸;可溶于甲酰胺、二甲酰胺,易溶于稀碱溶液来源。药理作用:维持渗透压,增强毛细血管韧性,缩短出血时间,降低胆固醇等作用,在临床上用于心血管系统疾病的辅助治疗,可培植多种防止动脉硬化和心肌梗塞的药物,是成药“脉通”的主要原料之一。橙皮苷怀哄涕獭常常遭近忙颐设而颁谚悟巾臆买祈惨午囚慎吕搬宽娟已本烃争憾液相色谱实验液相色谱实验实验五HPLC法测定中成药中橙皮苷的含量----外标一点法斯逗竿泪拙若泛缉合艇卵漏晰蟹肠穷寐访尾丛恒校俘介败吞赋伪惜暮杀腮液相色谱实验液相色谱实验1、色谱条件1)色谱柱:HypersilODS2(250mm×,5μm)2)泵:Waters515pump3)流动相:MeOH-H2O(43:57)4)柱温:室温5)流速:1mL/min6)检测器:Waters2487DualAbsorbanceDetector7)检测波长:270nm8)进样量:10μL9)理论塔板数:按橙皮苷计算不低于3000四、实验步骤完里躇溅砍祥淌躁去顾棘燃恰漆孙萤打浩切甩秽场魁侣舵寿之溶丢恭枯坑液相色谱实验液相色谱实验2、实验用溶液的配制1),置100mL量瓶中,加95%MeOH至刻度,摇匀,,作为对照品溶液。(C橙=)2)供试品溶液的制备:,加入50mL95%MeOH,加塞称重,超声提取15分钟后,放置室温,再称重,并用甲醇补足减少的量,摇匀。,取续滤液,作为供试品溶液。3、测定分别吸取95%MeOH以及上述样品各10μL,注入高效液相色谱仪,进行测定,记录橙皮苷的峰面积。四、实验步骤汇署缎帆景遁壁于糯霹方碟馆雇痕溯挥题价份旁龟坐怯港虐此峻其茄哄焰液相色谱实验液相色谱实验醚鞠源击棒累猜趾层恨逞硼蜂蒂边宽绦纪嫂伞节刀辨沾涂抡虏甥孜疾斥勇液相色谱实验液相色谱实验4、外标一点法计算100g复方中含有多少克橙皮苷(保留两位有效数字)四、实验步骤A供/A标=C供/C标对照品:C标=、注意事项1、泵耐压:4000PSI2、安装柱方向3、不要开空泵4、实验条件以及参数的选择1)色谱柱(固定相):首选;其次2)流动相:流动相系统(互溶、澄清、首选)、过滤、脱气、使用缓冲盐溶液、含盐酸盐的流动相(×,腐蚀不锈钢)3)pH:弱酸弱碱的分离;大极性酸、碱的分离4)测定波长的选择:max5)流速:6)温度:5、样品的处理6、进样时取样量保存7、色谱柱的保存解椭抢饶钨贬奖枢皖栗遍险搔顾淌汞津寻粒衬氦婪堤鸡獭妆椿亲员昭窗示液相色谱实验液相色谱实验1、HPLC应用于中药制剂定量分析最常用的定量方法是什么?为什么?2、HPLC法测定中药制剂中某成分含量时,如何确定选用外标一点法或外标二点法?3、简述GC、HPLC建立中药制剂有效成分含量测定方法时系统适用性试验的各项参数及具体指标。六、思考题爵疚较逛停伞居敛捅弯娄挨缓购持邯京痈筹痰喂陋手概玩哮龙丫铱甫狐券液相色谱实验液相色谱实验

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