固定化酶.ppt

文档介绍：1一、什么是固定化酶?水溶性酶水不溶性载体水不溶性酶(固定化酶)固定化技术第二章固定化酶2二、固定化酶的特点?优点:–不溶于水,易于与产物分离;–可反复使用;–可装塔连续化生产;–稳定性好。?缺点:-固定化过程中往往会引起酶的失活-首次投入成本高-大分子底物较困难3?(一)吸附法?(二)结合法?(三)交联法?(四)包埋法三、固定化酶的方法4(一)吸附法?物理吸附:利用各种固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上。选择载体的原则: - 要有巨大的比表面积- 要有活泼的表面- 便于装柱进行连续反应物理吸附法: -静止法-电沉积法-反应器上直接吸附法-混合浴或振荡浴吸附法5优点:固定化时酶分子的构象很少或基本不发生变化。缺点:结合力弱,易解吸附。载体:纤维素、琼脂糖、活性炭、沸石及硅胶等。6(二)结合法?1 离子键结合法?2 共价键结合法71 离子键结合法?酶分子含有离子交换基团的固相载体?第一个离子结合法固定化酶:?DEAE — Cellulose?固定化过氧化氢酶?第一个工业化的固定化酶:?DEAE-Sephadex A-50?固定化氨基酰化酶?常用载体:DEAE-纤维素,DEAE-葡聚糖凝胶?使用注意:pH、离子强度、温度82 共价键结合法?(1)概念?(2)可以形成共价键的基团:游离氨基,游离羧基,巯基,咪唑基,酚基,羟基,甲硫基,吲哚基,二硫键?(3)常用载体:天然高分子、人工合成的高聚物、无机载体9共价键结合法制备固定化酶的“通式”?首先载体上引进活泼基团??然后活化该活泼基团?最后此活泼基团再与酶分子上某一基团形成共价键10(4)载体活化的方法?(需载体具有芳香族氨基)????***法