文档介绍：。,具有两个或两个以上肽键的化合物(如蛋白质)可与Cu2+结合生成紫色化合物(双缩脲反应),颜色深浅与蛋白质浓度成正比,故可用比色法测定蛋白质的浓度。在一定条件下,未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应,并于520nm下比色,可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知样品的蛋白质浓度。、试管、试管架、恒温水浴槽、吸量管、分光光度计、比色皿试剂:①标准酪蛋白溶液10mg/ml②双缩脲试剂:·5H2O于100ml水中,加热溶解,取酒石酸钠10g、碘化钾5g,溶于500ml水中,再加5mol/LNaOH溶液300ml混合,倒入硫酸铜溶液,(1)取小试管7支,编号,按下表注入溶液试剂(ml)—        (2)混匀后,于37℃水浴中保温15min,在520nm波长下比色,以第6管调零点,测得各管的吸光度值为纵坐标,蛋白质的克数为横坐标,绘成曲线。(3)按表中第七管的数据加入溶液,在37℃水浴中放置15min,测其吸光度,根据吸光度值查标准曲线即得出每100ml小鼠肝脏蛋白原浆溶液中蛋白质的克数。        绘制曲线如下:由图可知,,,。;熟悉紫外分光光度计的使用。,当它与蛋白质结合后变为蓝色,在一定蛋白质浓度范围内,结合物在595nm波长下有最大吸收峰,测其光的吸收量即可得结合蛋白质的量。:分光光度计,试管,吸量管,比色皿试剂:①考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G-250100mg溶于50ml95%乙醇中,加入100ml85%磷酸,用蒸馏水稀释至1000ml。②标准蛋白溶液500μg/(1)取试管三支,按下表操作:试剂(ml)--标准蛋白溶液--样品--    (2)混匀,室温放置5min,在波长595nm处调零,测定各管吸光度值。,=()×500=