文档介绍：下;,、,.. 中华老年口腔目弹杂志年月第卷第期
· 论著·
大鼠脂肪间充质干细胞膜片的生物学特点研究术
刘娜张博李芳菲邓蔓菁
【摘要】目的:探讨利用大鼠脂肪问充质干细胞体外构建细胞膜片方法,并分析细胞膜片的生物学特点。
方法:从出生大鼠体内提取脂肪组织并获得纯化的脂肪问充质干细胞,
,将体外构建细胞膜片,待膜片成熟后采用倒置显微镜和染色对膜片进行形态学检测,实
时定量检测细胞、、、的基因表达水平,检测、、、
的蛋白表达情况。结果:纯化的体外诱导培养后获得白色膜状细胞膜片,镜下观察见细胞复
层生长,染色显示细胞间紧密连接并分泌大量细胞外基质,。结果表
明细胞膜片组、、、表达水平高于正常培养的组。蛋白学检
测与基因检测趋势一致。结论:体外培养大鼠脂肪间充质干细胞能构建细胞膜片,膜片的、、、
表达水平显著高于对照组。
关键词:脂肪间充质干细胞;细胞膜片;细胞因子
中国图书分类号文献标识码文章编号———

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组织工程技术的应用是实现组织再生的有效手段,传统组织工程多以种子细胞局部注射或与载体
结合的方式进行修复⋯,单纯的细胞植入导致细胞
基金项目:重庆市自然科学基金重点项目编号存活率低,而利用支架材料构建在一定程度上可提
高干细胞的存活与再生能力,但由于支架降解后留
刘娜解放军总医院口腔医学研究所主治医师下的空隙主要被细胞外基质所充满,细胞长入量少
北京
导致修复效果不理想,此外,支架的降解所带来的
张博北京军区总医院口腔科医师北京
非特异性感染是最大的危险。细胞膜片技术是在体
李芳菲第三军医大学附属第三医院野战外科研究所口腔科
硕士生重庆外通过诱导在短时间内促使种子细胞大量产生或分
邓蔓菁通讯作者第三军医大学附属第三医院野战外科泌细胞外基质,,将细
研究所口腔科主任医师教授重庆胞与细胞紧密连接形成一种三维片状结构的技术,
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中华老年口腔医学杂志年月第卷第期..
其避免了常规组织工程技术中外源性支架材料带了个数量分别均匀接种在直径培养皿中,加入
的诸多不利影响,而由种子细胞自分泌的细胞外基细胞膜片培养液含/抗坏血酸、%
质作为的自源性支架对于种子细胞生物学活性的发的,两天换液一次,孵育天后可
挥将起到倍增的放大作用。见培养皿底部出现透明白色膜状物,与培养皿底部
脂肪干细胞: 紧密贴合,为成熟的细胞膜片】。以常规
可作为种子细胞应用于组织修复与再生。培养的贴壁细胞为对照组%的。
本研究旨在成功构建细胞膜片的基础上, . 细胞膜片组织学检查取培养
对其基本生物学特性进行鉴定,分析自分泌的多种细胞膜片置于% 甲醛液固定,甲酸一甲酸钠复合
因子及蛋白探讨细胞膜片应用与复杂组织再生的可脱钙液脱钙,常规脱水,石蜡包埋,连续切
行性。片,染色。
. 时实时定量检测细胞膜片
.材料方法的表达选取常规培养的第代,待其在小
.材料天龄新生大鼠第三军医大学培养瓶底面汇合至约%时,用裂解并提
试验动物中心;胎牛血清,;新取总;同时选取诱导培养的细
生小牛血清,; 一培养基